Skip to content
LMH
Tissue
Gan
Disease
Ung thư tế bào gan
Synonyms
Leghorn Male Hepatoma cell line

Documents

LMH

Cell line · Product number 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào LMH, được phân lập từ khối u gan của một con gà trống giống Leghorn, là một dòng tế bào đa năng được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu sinh học. Tomoyuki Kitagawa đã thiết lập dòng tế bào này vào năm 1981 tại Viện Ung thư Tokyo, Nhật Bản. Các tế bào này có biểu hiện biểu mô và đặc biệt hữu ích cho việc nghiên cứu tương tác giữa vật chủ và tác nhân gây bệnh trong đường tiêu hóa của gia cầm.

Tế bào LMH là tế bào bám dính và có hình thái giống nhánh cây. Chúng biểu hiện glucose-6-phosphatase và hoạt động ATPase ống dẫn yếu. Với bộ nhiễm sắc thể tam bội và sáu nhiễm sắc thể dấu hiệu, các tế bào này có đặc điểm di truyền đặc trưng.
Đáng chú ý, tế bào LMH đã được chứng minh là có khả năng hỗ trợ hiệu quả quá trình tổng hợp DNA của virus viêm gan B ở vịt (DHBV) khi được chuyển gen bằng các cấu trúc virus. Điều này khiến chúng trở thành công cụ vô giá cho nghiên cứu vi sinh học, đặc biệt trong bối cảnh các nhiễm trùng virus liên quan đến gia cầm.
Quá trình tạo ra tế bào LMH bao gồm việc gây ra các khối u trong gan của gà Leghorn thông qua điều trị lâu dài bằng diethylnitrosamine. Các tế bào này cũng đã được biến đổi hóa học, cho phép chúng trở nên bất tử và nhân lên liên tục trong môi trường nuôi cấy.

Về khả năng gây ung thư, tế bào LMH có khả năng hình thành khối u ở chuột nude không có tuyến ức. Đặc điểm này khiến chúng trở thành mô hình quan trọng để nghiên cứu ung thư gan tế bào. Tế bào LMH biểu hiện thụ thể estrogen và có thể được kích thích để biểu hiện gen apolipoprotein II (apoII) đặc hiệu cho gan. Điều này cho thấy sự tham gia của chúng vào các con đường tín hiệu estrogen và chuyển hóa lipid. Để nuôi cấy tế bào LMH, cần phủ trước các dụng cụ nuôi cấy mô bằng collagen. Điều này đảm bảo sự bám dính và phát triển đúng cách của tế bào.

Tissue
Gan
Disease
Ung thư tế bào gan
Applications
Dòng tế bào này hữu ích cho các nghiên cứu chuyển gen.
Synonyms
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Classification

Organism
Chicken
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô, tương tự nhánh thần kinh.
Tumourigenic
Tế bào LMH hình thành khối u ở chuột không có tuyến ức.
Karyotype
Tam bội, số lượng nhiễm sắc thể trung bình = 116, sáu nhiễm sắc thể đánh dấu

04Identifiers

Citation
LMH (Số catalog Cytion 601411)
NCBI TaxID
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
Estrogen (mức độ biểu hiện thấp).
Products
Glucose-6-phosphatase, hoạt động của ATPase ống dẫn (yếu)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Tế bào LMH bám dính tốt hơn vào các bình nuôi cấy mô đã được phủ sẵn Collagen. Loại bỏ môi trường nuôi cấy và rửa các tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (3-5 ml PBS cho bình T25, 5-10 ml cho bình T75). Thêm Accutase (1-2 ml cho mỗi bình T25, 2,5 ml cho mỗi bình T75), đảm bảo lớp tế bào được phủ hoàn toàn. Ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút. Cẩn thận tái phân tán tế bào bằng môi trường (10 ml), ly tâm trong 3 phút ở 300 g, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và phân phối vào các bình nuôi cấy mới chứa môi trường tươi
Seeding density
1 đến 3 × 10⁴ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 2 ngày
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
Leghorn
Donor age
16 tháng