
- Vävnad
- Lever
- Sjukdom
- Hepatocellulärt karcinom
- Synonymer
- Leghorn Male Hepatoma cell line
Dokument
LMH
Cell line · Produktnummer 601411
LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...
Anpassning / Rekommendationer
- LMHCell line€550.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
LMH-celler, som härrör från ett hepatom från en Leghorn-hane, är en mångsidig cellinje som används flitigt inom biologisk forskning. Tomoyuki Kitagawa etablerade dem 1981 vid Cancer Institute i Tokyo, Japan. Dessa celler har en epitelial fenotyp och är särskilt användbara för att studera värd-patogeninteraktioner i mag-tarmkanalen hos fjäderfä.
LMH-cellerna är adherenta och uppvisar en dendritiskliknande morfologi. De uttrycker glukos-6-fosfatas och svag kanalikulär ATPas-aktivitet. Med en triploid karyotyp och sex markörkromosomer uppvisar dessa celler distinkta genetiska egenskaper.
Framför allt har LMH-celler visat sig effektivt stödja DNA-syntesen av DHBV-virus (duck hepatitis B virus) när de transfekteras med viruskonstruktioner. Detta gör dem till ett ovärderligt verktyg för virologisk forskning, särskilt i samband med fjäderfä-relaterade virusinfektioner.
För att få fram LMH-cellerna inducerades tumörartade knutor i levern hos leghornhöns genom långtidsbehandling med dietylnitrosamin. Dessa celler har också transformerats kemiskt, vilket har gjort det möjligt att odödliggöra dem och kontinuerligt föröka dem i kultur.När det gäller tumörframkallande förmåga har LMH-cellerna förmåga att bilda tumörer i athymiska nakenmöss. Denna egenskap gör dem till en viktig modell för att studera hepatocellulärt karcinom. LMH-celler uttrycker östrogenreceptorn och kan induceras att uttrycka den leverspecifika apolipoprotein II (apoII)-genen. Detta tyder på att de är involverade i östrogenets signalvägar och lipidmetabolism. För att odla LMH-celler måste vävnadsodlingskärlen förses med kollagen. Detta säkerställer korrekt celladhesion och tillväxt.
- Vävnad
- Lever
- Sjukdom
- Hepatocellulärt karcinom
- Ansökningar
- Cellinjen är användbar för transfektionsstudier.
- Synonymer
- Leghorn Male Hepatoma cell line
02Klassificering
- Organism
- Kyckling
- Kön
- Man
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelliknande, Dendritiskliknande.
- Tumörframkallande
- LMH-celler bildar tumörer i athymiska möss.
- Karyotyp
- Triploid, modalt antal = 116, sex markörkromosomer
04Identifierare
- Källa
- LMH (Cytion katalognummer 601411)
- NCBI-skattenummer
- 9031
- Cellosaurus
- CVCL_2580
05Uttryck och mottaglighet
- Receptorer som uttrycks
- Östrogen (låg nivå av uttryck).
- Produkter
- Glukos-6-fosfatas, ATPas-aktivitet i kanalen (svag)
06Hantering och odling
- Odlingsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- LMH-celler fäster bättre på vävnadsodlingskärl som har förbelagts med kollagen. Avlägsna medium och skölj de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (3-5 ml PBS för T25, 5-10 ml för T75 cellodlingskolvar). Tillsätt Accutase (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75 cellodlingsflaska), cellarket måste täckas helt. Inkubera vid rumstemperatur i 8-10 minuter. Resuspendera cellerna försiktigt med medium (10 ml), centrifugera i 3 minuter vid 300 g, resuspendera cellerna i färskt medium och fördela i nya kolvar som innehåller färskt medium
- Såtäthet
- 1 till 3 x 104 celler/cm2
- Vätskeförnyelse
- Var 2:a dag
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
08Donator
- Ras / underart
- Leghorn
- Donatorns ålder
- 16 månader
09Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Ansvarsfriskrivning
- Våra celler tillhandahålls uteslutande för in vitro-laboratorieforskning och är inte avsedda för klinisk eller diagnostisk användning, och de ska inte heller administreras till människor eller användas för veterinära ändamål. Användare måste följa alla tillämpliga riktlinjer och föreskrifter för hantering och användning av dessa celler i en forskningsmiljö.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja