Gå direkt till innehållet
LMH
Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Synonymer
Leghorn Male Hepatoma cell line

LMH

Cell line · Produktnummer 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

LMH-celler, som härrör från ett hepatom från en Leghorn-hane, är en mångsidig cellinje som används flitigt inom biologisk forskning. Tomoyuki Kitagawa etablerade dem 1981 vid Cancer Institute i Tokyo, Japan. Dessa celler har en epitelial fenotyp och är särskilt användbara för att studera värd-patogeninteraktioner i mag-tarmkanalen hos fjäderfä.

LMH-cellerna är adherenta och uppvisar en dendritiskliknande morfologi. De uttrycker glukos-6-fosfatas och svag kanalikulär ATPas-aktivitet. Med en triploid karyotyp och sex markörkromosomer uppvisar dessa celler distinkta genetiska egenskaper.
Framför allt har LMH-celler visat sig effektivt stödja DNA-syntesen av DHBV-virus (duck hepatitis B virus) när de transfekteras med viruskonstruktioner. Detta gör dem till ett ovärderligt verktyg för virologisk forskning, särskilt i samband med fjäderfä-relaterade virusinfektioner.
För att få fram LMH-cellerna inducerades tumörartade knutor i levern hos leghornhöns genom långtidsbehandling med dietylnitrosamin. Dessa celler har också transformerats kemiskt, vilket har gjort det möjligt att odödliggöra dem och kontinuerligt föröka dem i kultur.

När det gäller tumörframkallande förmåga har LMH-cellerna förmåga att bilda tumörer i athymiska nakenmöss. Denna egenskap gör dem till en viktig modell för att studera hepatocellulärt karcinom. LMH-celler uttrycker östrogenreceptorn och kan induceras att uttrycka den leverspecifika apolipoprotein II (apoII)-genen. Detta tyder på att de är involverade i östrogenets signalvägar och lipidmetabolism. För att odla LMH-celler måste vävnadsodlingskärlen förses med kollagen. Detta säkerställer korrekt celladhesion och tillväxt.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Ansökningar
Cellinjen är användbar för transfektionsstudier.
Synonymer
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02Klassificering

Organism
Kyckling
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande, Dendritiskliknande.
Tumörframkallande
LMH-celler bildar tumörer i athymiska möss.
Karyotyp
Triploid, modalt antal = 116, sex markörkromosomer

04Identifierare

Källa
LMH (Cytion katalognummer 601411)
NCBI-skattenummer
9031
Cellosaurus
CVCL_2580

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
Östrogen (låg nivå av uttryck).
Produkter
Glukos-6-fosfatas, ATPas-aktivitet i kanalen (svag)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
LMH-celler fäster bättre på vävnadsodlingskärl som har förbelagts med kollagen. Avlägsna medium och skölj de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (3-5 ml PBS för T25, 5-10 ml för T75 cellodlingskolvar). Tillsätt Accutase (1-2 ml per T25, 2,5 ml per T75 cellodlingsflaska), cellarket måste täckas helt. Inkubera vid rumstemperatur i 8-10 minuter. Resuspendera cellerna försiktigt med medium (10 ml), centrifugera i 3 minuter vid 300 g, resuspendera cellerna i färskt medium och fördela i nya kolvar som innehåller färskt medium
Såtäthet
1 till 3 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Var 2:a dag
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
Leghorn
Donatorns ålder
16 månader