LMH

Las células LMH, derivadas de un hepatoma macho Leghorn, son una línea celular versátil ampliamente utilizada en la investigación biológica. Tomoyuki Kitagawa las creó en 1981 en el Instituto del Cáncer de Tokio (Japón). Estas células tienen un fenotipo epitelial y son especialmente útiles para estudiar las interacciones huésped-patógeno en el tracto gastrointestinal de las aves de corral.

Las células LMH son adherentes y presentan una morfología dendrítica. Expresan glucosa-6-fosfatasa y una débil actividad ATPasa canalicular. Con un cariotipo triploide y seis cromosomas marcadores, estas células presentan características genéticas distintivas.
En particular, se ha demostrado que las células LMH soportan eficazmente la síntesis de ADN del virus de la hepatitis B pato (VHBP) cuando se transfectan con constructos virales. Esto las convierte en una herramienta inestimable para la investigación virológica, sobre todo en el contexto de las infecciones víricas relacionadas con las aves de corral.
Para obtener células LMH se indujeron nódulos tumorales en el hígado de pollos Leghorn mediante un tratamiento prolongado con dietilnitrosamina. Estas células también se han transformado químicamente, lo que ha permitido su inmortalización y propagación continua en cultivo.

En términos de tumorigenicidad, las células LMH tienen la capacidad de formar tumores en ratones atímicos desnudos. Esta característica las convierte en un importante modelo para el estudio del carcinoma hepatocelular. Las células LMH expresan el receptor de estrógenos y pueden ser inducidas a expresar el gen de la apolipoproteína II (apoII) específico del hígado. Esto indica su implicación en las vías de señalización de los estrógenos y en el metabolismo de los lípidos. Para cultivar células LMH, es necesario recubrir previamente los vasos de cultivo tisular con colágeno. Esto garantiza la adhesión y el crecimiento adecuados de las células.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía