LMH

Τα κύτταρα LMH, που προέρχονται από ένα αρσενικό ηπάτωμα Leghorn, είναι μια ευέλικτη κυτταρική σειρά που χρησιμοποιείται ευρέως στη βιολογική έρευνα. Ο Tomoyuki Kitagawa τα δημιούργησε το 1981 στο Ινστιτούτο Καρκίνου στο Τόκιο της Ιαπωνίας. Τα κύτταρα αυτά έχουν επιθηλιακό φαινότυπο και είναι ιδιαίτερα χρήσιμα για τη μελέτη των αλληλεπιδράσεων ξενιστή-παθογόνου στο γαστρεντερικό σύστημα των πουλερικών.

Τα κύτταρα LMH είναι προσκολλημένα και παρουσιάζουν μορφολογία που μοιάζει με δενδριτική. Εκφράζουν γλυκόζη-6-φωσφατάση και ασθενή δραστηριότητα καναλικής ATPάσης. Με τριπλοειδή καρυότυπο και έξι χρωμοσώματα-δείκτες, τα κύτταρα αυτά εμφανίζουν διακριτά γενετικά χαρακτηριστικά.
Ειδικότερα, έχει αποδειχθεί ότι τα κύτταρα LMH υποστηρίζουν αποτελεσματικά τη σύνθεση του DNA του ιού της ηπατίτιδας Β της πάπιας (DHBV) όταν διαμολύνεται με ιικές κατασκευές. Αυτό τα καθιστά ανεκτίμητο εργαλείο για την έρευνα της ιολογίας, ιδίως στο πλαίσιο των ιογενών λοιμώξεων που σχετίζονται με τα πουλερικά.
Η παραγωγή των κυττάρων LMH περιλάμβανε την πρόκληση καρκινικών οζιδίων στο ήπαρ κοτόπουλων Leghorn μέσω μακροχρόνιας θεραπείας με διαιθυλνιτροζαμίνη. Τα κύτταρα αυτά μετασχηματίστηκαν επίσης χημικά, επιτρέποντας την αθανασία τους και τον συνεχή πολλαπλασιασμό τους σε καλλιέργεια.

Όσον αφορά την καρκινικότητα, τα κύτταρα LMH έχουν την ικανότητα να σχηματίζουν όγκους σε αθυμικά γυμνά ποντίκια. Το χαρακτηριστικό αυτό τα καθιστά σημαντικό μοντέλο για τη μελέτη του ηπατοκυτταρικού καρκινώματος. Τα κύτταρα LMH εκφράζουν τον υποδοχέα οιστρογόνων και μπορούν να επαχθούν για να εκφράσουν το ειδικό για το ήπαρ γονίδιο της απολιποπρωτεΐνης ΙΙ (apoII). Αυτό υποδηλώνει τη συμμετοχή τους στα μονοπάτια σηματοδότησης των οιστρογόνων και στο μεταβολισμό των λιπιδίων. Για την καλλιέργεια των κυττάρων LMH, είναι απαραίτητο να προεπικαλυφθούν τα αγγεία καλλιέργειας ιστού με κολλαγόνο. Αυτό εξασφαλίζει τη σωστή προσκόλληση και ανάπτυξη των κυττάρων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης