LMH

LMH buňky, odvozené z leghornského samčího hepatomu, jsou univerzální buněčnou linií hojně využívanou v biologickém výzkumu. Tomoyuki Kitagawa je založil v roce 1981 v Ústavu pro výzkum rakoviny v japonském Tokiu. Tyto buňky mají epiteliální fenotyp a jsou zvláště užitečné pro studium interakcí mezi hostitelem a patogenem v gastrointestinálním traktu drůbeže.

LMH buňky jsou adherentní a vykazují morfologii podobnou dendritům. Exprimují glukózo-6-fosfatázu a slabou aktivitu kanálové ATPázy. Díky triploidnímu karyotypu a šesti markerovým chromozomům vykazují tyto buňky odlišné genetické vlastnosti.
Bylo prokázáno, že buňky LMH účinně podporují syntézu DNA viru kachní hepatitidy B (DHBV), když jsou transfekovány virovými konstrukty. To z nich činí neocenitelný nástroj pro virologický výzkum, zejména v souvislosti s virovými infekcemi drůbeže.
Odvození buněk LMH zahrnovalo vyvolání nádorových uzlíků v játrech kuřat plemene Leghorn dlouhodobým působením dietylnitrosaminu. Tyto buňky byly rovněž chemicky transformovány, což umožnilo jejich imortalizaci a kontinuální množení v kultuře.

Pokud jde o nádorovou aktivitu, buňky LMH mají schopnost vytvářet nádory u athymických nahých myší. Tato vlastnost z nich činí důležitý model pro studium hepatocelulárního karcinomu. LMH buňky exprimují estrogenový receptor a lze u nich vyvolat expresi genu pro jaterní apolipoprotein II (apoII). To naznačuje jejich zapojení do estrogenových signálních drah a metabolismu lipidů. Pro kultivaci buněk LMH je nutné předem pokrýt nádoby pro tkáňové kultury kolagenem. Tím se zajistí správná adheze a růst buněk.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení