LMH

Le cellule LMH, derivate da un epatoma maschile Leghorn, sono una linea cellulare versatile ampiamente utilizzata nella ricerca biologica. Tomoyuki Kitagawa le ha create nel 1981 presso il Cancer Institute di Tokyo, in Giappone. Queste cellule hanno un fenotipo epiteliale e sono particolarmente utili per studiare le interazioni ospite-patogeno nel tratto gastrointestinale del pollame.

Le cellule LMH sono aderenti e presentano una morfologia dendritica. Esprimono glucosio-6-fosfatasi e una debole attività di ATPasi canalicolare. Con un cariotipo triploide e sei cromosomi marcatori, queste cellule presentano caratteristiche genetiche distinte.
In particolare, è stato dimostrato che le cellule LMH supportano efficacemente la sintesi del DNA del virus dell'epatite B anatra (DHBV) quando vengono trasfettate con costrutti virali. Ciò le rende uno strumento prezioso per la ricerca virologica, in particolare nel contesto delle infezioni virali legate al pollame.
La derivazione delle cellule LMH ha comportato l'induzione di noduli tumorali nel fegato di polli Leghorn attraverso un trattamento a lungo termine con dietilnitrosamina. Queste cellule sono state anche trasformate chimicamente, consentendo la loro immortalizzazione e la propagazione continua in coltura.

In termini di tumorigenicità, le cellule LMH hanno la capacità di formare tumori in topi nudi atimici. Questa caratteristica le rende un modello importante per lo studio del carcinoma epatocellulare. Le cellule LMH esprimono il recettore degli estrogeni e possono essere indotte a esprimere il gene dell'apolipoproteina II (apoII) specifico del fegato. Ciò indica il loro coinvolgimento nelle vie di segnalazione degli estrogeni e nel metabolismo dei lipidi. Per coltivare le cellule LMH, è necessario prevestire i vasi di coltura tissutale con collagene. Questo assicura una corretta adesione e crescita delle cellule.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia