LMH

תאי LMH, שמקורם בהפטומה של זכר מסוג Leghorn, הם קו תאים רב-תכליתי הנמצא בשימוש נרחב במחקר ביולוגי. Tomoyuki Kitagawa הקים אותם בשנת 1981 במכון הסרטן בטוקיו, יפן. לתאים אלה יש פנוטיפ אפיתליאלי והם שימושיים במיוחד לחקר האינטראקציות בין הפתוגן למאכסן במערכת העיכול של עופות.

תאי LMH הם תאים דבקים ומציגים מורפולוגיה דמוית דנדריטים. הם מבטאים גלוקוז-6-פוספטאז ופעילות ATPase תעלתית חלשה. עם קריוטיפ משולש ושישה כרומוזומים סמנים, תאים אלה מציגים מאפיינים גנטיים מובהקים.
בפרט, תאי LMH הוכחו כתומכים ביעילות בסינתזת DNA של נגיף הפטיטיס B של ברווזים (DHBV) כאשר הם עוברים טרנספקציה עם קונסטרוקטים נגיפיים. זה הופך אותם לכלי יקר ערך למחקר וירולוגי, במיוחד בהקשר של זיהומים נגיפיים הקשורים לעופות.
הפקת תאי LMH כללה גרימת גושים סרטניים בכבד של תרנגולות לגורן באמצעות טיפול ממושך בדיאתילניטרוזאמין. תאים אלה עברו גם שינוי כימי, המאפשר את הנצחתם והתרבותם המתמשכת בתרבית.

מבחינת יכולת גידולי, לתאי LMH יש יכולת ליצור גידולים בעכברי עירום א-תימוניים. מאפיין זה הופך אותם למודל חשוב לחקר קרצינומה הפטוצלולרית. תאי LMH מבטאים את קולטן האסטרוגן וניתן לגרום להם לבטא את הגן apolipoprotein II (apoII) הספציפי לכבד. הדבר מעיד על מעורבותם במסלולי איתות האסטרוגן ובמטבוליזם השומנים. כדי לתרבת תאי LMH, יש לצפות מראש את כלי התרבית ברקמה בקולגן. הדבר מבטיח הידבקות וצמיחה תקינה של התאים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו