LMH

As células LMH, derivadas de um hepatoma de Leghorn macho, são uma linha celular versátil amplamente utilizada na investigação biológica. Tomoyuki Kitagawa criou-as em 1981 no Instituto do Cancro em Tóquio, Japão. Estas células têm um fenótipo epitelial e são particularmente úteis para estudar as interações entre o hospedeiro e o agente patogénico no trato gastrointestinal das aves de capoeira.

As células LMH são aderentes e apresentam uma morfologia de tipo dendrítico. Expressam glucose-6-fosfatase e uma fraca atividade de ATPase canalicular. Com um cariótipo triploide e seis cromossomas marcadores, estas células apresentam caraterísticas genéticas distintas.
Nomeadamente, foi demonstrado que as células LMH suportam eficazmente a síntese de ADN do vírus da hepatite B do pato (DHBV) quando transfectadas com construções virais. Isto torna-as uma ferramenta inestimável para a investigação virológica, particularmente no contexto das infecções virais relacionadas com as aves de capoeira.
A derivação de células LMH envolveu a indução de nódulos tumorais no fígado de galinhas Leghorn através de um tratamento a longo prazo com dietilnitrosamina. Estas células foram também transformadas quimicamente, permitindo a sua imortalização e propagação contínua em cultura.

Em termos de tumorigenicidade, as células LMH têm a capacidade de formar tumores em ratinhos nus atímicos. Esta caraterística torna-as um modelo importante para o estudo do carcinoma hepatocelular. As células LMH expressam o recetor de estrogénio e podem ser induzidas a expressar o gene da apolipoproteína II (apoII) específico do fígado. Isto indica o seu envolvimento nas vias de sinalização dos estrogénios e no metabolismo lipídico. Para cultivar células LMH, é necessário revestir previamente os vasos de cultura de tecidos com colagénio. Isto assegura a adesão e o crescimento adequados das células.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia