LMH

LMH-cellen, afkomstig van een Leghorn mannelijk hepatoom, zijn een veelzijdige cellijn die veel wordt gebruikt in biologisch onderzoek. Tomoyuki Kitagawa richtte ze in 1981 op aan het kankerinstituut in Tokio, Japan. Deze cellen hebben een epitheliaal fenotype en zijn vooral nuttig voor het bestuderen van interacties tussen gastheer en ziekteverwekker in het maagdarmkanaal van pluimvee.

LMH-cellen zijn adherent en vertonen een dendritische morfologie. Ze brengen glucose-6-fosfatase en een zwakke kanaal ATPase-activiteit tot expressie. Met een triploïde karyotype en zes markerchromosomen vertonen deze cellen duidelijke genetische kenmerken.
Met name is aangetoond dat LMH-cellen efficiënt de DNA-synthese van het eendenhepatitis B-virus (DHBV) ondersteunen wanneer ze zijn getransfecteerd met virale constructen. Dit maakt ze van onschatbare waarde voor virologisch onderzoek, met name in de context van pluimvee-gerelateerde virale infecties.
LMH-cellen werden verkregen door tumorknobbels te induceren in de lever van Leghorn-kippen via langdurige behandeling met diethylnitrosamine. Deze cellen zijn ook chemisch getransformeerd, waardoor ze geïmmortaliseerd konden worden en continu in kweek gehouden konden worden.

Wat betreft tumorigeniciteit zijn LMH-cellen in staat om tumoren te vormen in athymische naakte muizen. Deze eigenschap maakt ze tot een belangrijk model voor het bestuderen van hepatocellulair carcinoom. LMH-cellen brengen de oestrogeenreceptor tot expressie en kunnen worden geïnduceerd om het leverspecifieke apolipoproteïne II-gen (apoII) tot expressie te brengen. Dit wijst op hun betrokkenheid bij oestrogeensignaleringsroutes en vetmetabolisme. Om LMH-cellen te kweken is het nodig om weefselkweekvaten voor te coaten met collageen. Dit zorgt voor een goede celadhesie en groei.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring