الانتقال إلى المحتوى
LMH
الأنسجة
الكبد
المرض
سرطان الخلايا الكبدية
المرادفات
Leghorn Male Hepatoma cell line

المستندات

LMH

Cell line · رقم المنتج 601411

LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تعد خلايا LMH، المشتقة من ورم كبدي ذكري من نوع ليغورن الذكوري، خط خلوي متعدد الاستخدامات يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية. وقد أنشأها تومويوكي كيتاغاوا في عام 1981 في معهد السرطان في طوكيو، اليابان. وتتميز هذه الخلايا بنمط ظاهري طلائي وهي مفيدة بشكل خاص لدراسة التفاعلات بين المضيف ومسببات الأمراض في الجهاز الهضمي للدواجن.

تتسم خلايا LMH بالالتصاق وتُظهر شكلاً شبيهاً بالتغصنات. وهي تعبّر عن الجلوكوز 6-فوسفاتيز ونشاط ضعيف لأنزيم ATPase القنوي. تتميز هذه الخلايا بنمط نووي ثلاثي الصبغيات وستة كروموسومات مميزة، وتُظهر هذه الخلايا خصائص جينية مميزة.
وتجدر الإشارة إلى أن خلايا LMH أثبتت أنها تدعم بكفاءة تخليق الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد الوبائي باء (DHBV) عند نقلها بتركيبات فيروسية. وهذا ما يجعلها أداة لا تقدر بثمن لأبحاث علم الفيروسات، لا سيما في سياق العدوى الفيروسية المتعلقة بالدواجن.
اشتمل اشتقاق خلايا LMH على تحفيز العقيدات الورمية في كبد دجاج ليغورن من خلال المعالجة طويلة الأمد بثنائي إيثيل نيتروسامين. كما تم تحويل هذه الخلايا كيميائيًا، مما سمح بتخليدها وتكاثرها المستمر في المستنبت.

من حيث التكاثر الورمي، تتمتع خلايا LMH بالقدرة على تكوين أورام في الفئران العارية اللاأخلاقيات. هذه الخاصية تجعلها نموذجاً مهماً لدراسة سرطان الخلايا الكبدية. تعبّر خلايا LMH عن مستقبلات الإستروجين ويمكن تحفيزها للتعبير عن جين البروتين الشحمي الثاني (apoII) الخاص بالكبد. وهذا يشير إلى مشاركتها في مسارات إشارات الإستروجين واستقلاب الدهون. لاستزراع خلايا LMH، من الضروري تغليف أوعية زراعة الأنسجة بالكولاجين. وهذا يضمن الالتصاق والنمو السليم للخلايا.

الأنسجة
الكبد
المرض
سرطان الخلايا الكبدية
التطبيقات
يُفيد خط الخلايا في دراسات نقل العدوى.
المرادفات
  • Leghorn Male Hepatoma cell line

02التصنيف

كائن حي
الدجاج
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيهة بالظهارية وشبيهة بالتشعبية.
مُسبِّب للأورام
تشكّل خلايا LMH أورامًا في الفئران غير المتجانسة.
النمط الكروموسومي
ثلاثي الصيغة الصبغيات الثلاثية، العدد النموذجي = 116، ستة كروموسومات مؤشِّرة

04المعرّفات

المرجع
LMH (الرقم الكتالوجي لسيتيون 601411)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9031
سيلوصور
CVCL_2580

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
الإستروجين (تعبير منخفض المستوى).
المنتجات
الجلوكوز 6-فوسفاتيز، نشاط إنزيم الفوسفاتيز القنوي (ضعيف)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
تلتصق خلايا LMH بشكل أفضل بأوعية زراعة الأنسجة التي تم طلاؤها مسبقًا بالكولاجين. أزل الوسط واشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). إضافة أكوتاز (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، يجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضانها في درجة الحرارة المحيطة لمدة 8-10 دقائق. يُعاد غمر الخلايا بعناية بالوسط (10 مل)، ثم يُعاد غمر الخلايا في وسط جديد ويُوزع في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد
كثافة البذر
1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
كل يومين
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
ليغورن
عمر المتبرع
16 شهرًا