
- الأنسجة
- الكبد
- المرض
- سرطان الخلايا الكبدية
- المرادفات
- Leghorn Male Hepatoma cell line
المستندات
LMH
Cell line · رقم المنتج 601411
LMH cells, derived from a Leghorn male hepatoma, are a versatile cell line widely used in biological research. Tomoyuki Kitagawa established them in 1981 ...
التخصيص / التوصيات
- LMHCell line€550.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
تعد خلايا LMH، المشتقة من ورم كبدي ذكري من نوع ليغورن الذكوري، خط خلوي متعدد الاستخدامات يستخدم على نطاق واسع في الأبحاث البيولوجية. وقد أنشأها تومويوكي كيتاغاوا في عام 1981 في معهد السرطان في طوكيو، اليابان. وتتميز هذه الخلايا بنمط ظاهري طلائي وهي مفيدة بشكل خاص لدراسة التفاعلات بين المضيف ومسببات الأمراض في الجهاز الهضمي للدواجن.
تتسم خلايا LMH بالالتصاق وتُظهر شكلاً شبيهاً بالتغصنات. وهي تعبّر عن الجلوكوز 6-فوسفاتيز ونشاط ضعيف لأنزيم ATPase القنوي. تتميز هذه الخلايا بنمط نووي ثلاثي الصبغيات وستة كروموسومات مميزة، وتُظهر هذه الخلايا خصائص جينية مميزة.
وتجدر الإشارة إلى أن خلايا LMH أثبتت أنها تدعم بكفاءة تخليق الحمض النووي لفيروس التهاب الكبد الوبائي باء (DHBV) عند نقلها بتركيبات فيروسية. وهذا ما يجعلها أداة لا تقدر بثمن لأبحاث علم الفيروسات، لا سيما في سياق العدوى الفيروسية المتعلقة بالدواجن.
اشتمل اشتقاق خلايا LMH على تحفيز العقيدات الورمية في كبد دجاج ليغورن من خلال المعالجة طويلة الأمد بثنائي إيثيل نيتروسامين. كما تم تحويل هذه الخلايا كيميائيًا، مما سمح بتخليدها وتكاثرها المستمر في المستنبت.من حيث التكاثر الورمي، تتمتع خلايا LMH بالقدرة على تكوين أورام في الفئران العارية اللاأخلاقيات. هذه الخاصية تجعلها نموذجاً مهماً لدراسة سرطان الخلايا الكبدية. تعبّر خلايا LMH عن مستقبلات الإستروجين ويمكن تحفيزها للتعبير عن جين البروتين الشحمي الثاني (apoII) الخاص بالكبد. وهذا يشير إلى مشاركتها في مسارات إشارات الإستروجين واستقلاب الدهون. لاستزراع خلايا LMH، من الضروري تغليف أوعية زراعة الأنسجة بالكولاجين. وهذا يضمن الالتصاق والنمو السليم للخلايا.
- الأنسجة
- الكبد
- المرض
- سرطان الخلايا الكبدية
- التطبيقات
- يُفيد خط الخلايا في دراسات نقل العدوى.
- المرادفات
- Leghorn Male Hepatoma cell line
02التصنيف
- كائن حي
- الدجاج
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- شبيهة بالظهارية وشبيهة بالتشعبية.
- مُسبِّب للأورام
- تشكّل خلايا LMH أورامًا في الفئران غير المتجانسة.
- النمط الكروموسومي
- ثلاثي الصيغة الصبغيات الثلاثية، العدد النموذجي = 116، ستة كروموسومات مؤشِّرة
04المعرّفات
- المرجع
- LMH (الرقم الكتالوجي لسيتيون 601411)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9031
- سيلوصور
- CVCL_2580
05التعبير والقابلية للإصابة
- المستقبلات المُعبَّر عنها
- الإستروجين (تعبير منخفض المستوى).
- المنتجات
- الجلوكوز 6-فوسفاتيز، نشاط إنزيم الفوسفاتيز القنوي (ضعيف)
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- تلتصق خلايا LMH بشكل أفضل بأوعية زراعة الأنسجة التي تم طلاؤها مسبقًا بالكولاجين. أزل الوسط واشطف الخلايا الملتصقة باستخدام PBS بدون الكالسيوم والمغنيسيوم (3-5 مل من PBS لكل T25، 5-10 مل لقوارير زراعة الخلايا T75). إضافة أكوتاز (1-2 مل لكل T25، 2.5 مل لكل قارورة زراعة خلايا T75)، يجب تغطية صفيحة الخلية بالكامل. احتضانها في درجة الحرارة المحيطة لمدة 8-10 دقائق. يُعاد غمر الخلايا بعناية بالوسط (10 مل)، ثم يُعاد غمر الخلايا في وسط جديد ويُوزع في قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد
- كثافة البذر
- 1 إلى 3 × 104 خلية/سم2
- تجديد السوائل
- كل يومين
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- ليغورن
- عمر المتبرع
- 16 شهرًا
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- إخلاء المسؤولية
- يتم توفير خلايانا لأغراض الأبحاث المختبرية في المختبر حصرياً وليست مخصصة للاستخدام السريري أو التشخيصي، ولا يتم إعطاؤها للبشر أو استخدامها للأغراض البيطرية. يجب على المستخدمين الالتزام بجميع الإرشادات واللوائح المعمول بها للتعامل مع هذه الخلايا واستخدامها في بيئة بحثية.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم