MNNG-HOS (CL #5)

La lignée cellulaire MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] est dérivée de la lignée cellulaire humaine d'ostéosarcome HOS par transformation in vitro avec de la N-méthyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) à une concentration de 0,01 mcg/ml. Ce composé est un puissant cancérigène, et la transformation a entraîné des propriétés tumorigènes significatives, mises en évidence par la formation de tumeurs chez des souris nues dans les 21 jours à une fréquence de 100 % lorsqu'elles ont été inoculées par voie sous-cutanée avec 10⁷ cellules. Ces tumeurs se sont avérées être des sarcomes ou des ostéosarcomes peu différenciés. La lignée cellulaire a été initialement établie à partir d'une patiente blanche de 13 ans atteinte d'ostéosarcome et présente des propriétés de croissance adhérente.

Sur le plan fonctionnel, les cellules MNNG/HOS Cl #5 présentent une densité de saturation élevée et une efficacité de plaquage élevée dans l'agar mou, ce qui reflète leur croissance indépendante de l'ancrage, une caractéristique de la transformation maligne. De plus, ces cellules présentent une activité fibrinolytique notable, qui a été associée à un potentiel tumorigène accru. Par rapport aux cellules HOS non traitées, les cellules traitées au MNNG présentent des propriétés d'agrégation cellulaire plus robustes et une plus grande propension à former des colonies dans l'agar mou, ce qui correspond à leur capacité à former des tumeurs. Lors d'expériences, les cellules transformées au MNNG ont produit des tumeurs chez des souris nues et des hamsters, avec des cellules ressemblant à la lignée HOS parentale, tandis que les cellules non traitées n'étaient pas tumorigènes dans des conditions similaires.

Cette lignée cellulaire est également utile pour étudier la progression du cancer et la biologie des tumeurs, en particulier l'ostéosarcome, car elle fournit un modèle de transformation induite chimiquement. La capacité de ces cellules à se développer dans un environnement immunodéprimé (par exemple, des souris nues) en fait un outil précieux pour la recherche préclinique sur le cancer, permettant d'étudier les mécanismes tumorigènes et de tester potentiellement des interventions thérapeutiques.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie