Pereiti prie turinio
MNNG-HOS (CL #5)
Audinys
Kaulas
Liga
Osteosarkoma
Sinonimai
MNNG/HOS, MNNG-HOS, HOS-MNNG, HOS/MNNG, MNNGHOS, MNNG/HOS (Cl#5), MNNG/HOS Clone F-5, MNNG, R-1059-D, TE85, Te85, TE-85, HOS-TE85, Hos TE-85, HOS TE 85, HOS TE85, HOS (TE85), HOS(TE85), HOS (TE85, Clone F5), MNNG-HOS (TE 85, clone F-5), TE-85 clone F-5, HOS-Te85, TE 85.T, TE 85 ClF-5, TE-85 clone 5

Dokumentai

MNNG-HOS (CL #5)

Cell line · Prekės numeris 300289

The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Mažos atsargos
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

MNNG/HOS Cl #5 ląstelių linija [R-1059-D] yra gauta iš žmogaus osteosarkomos ląstelių linijos HOS, transformuojant in vitro N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinu (MNNG) 0,01 mcg/ml koncentracija. Šis junginys yra stiprus kancerogenas, o transformacija sukėlė reikšmingas tumorigenines savybes, kurias patvirtina navikų susidarymas nuogosiose pelėse per 21 dieną 100 % dažniu, kai buvo įskiepytos 107 ląstelės. Buvo pastebėta, kad šie navikai yra silpnai diferencijuoti sarkomai arba osteosarkomai. Ląstelių linija buvo sukurta iš 13 metų amžiaus baltos odos moters, sergančios osteosarkoma, ir pasižymi adhezinėmis augimo savybėmis.

Funkciniu požiūriu MNNG/HOS Cl #5 ląstelės pasižymi dideliu prisotinimo tankiu ir dideliu plokštelės efektyvumu minkštoje agaro terpėje, o tai atspindi jų sustiprintą nuo tvirtinimo nepriklausomą augimą, kuris yra piktybinės transformacijos požymis. Be to, šios ląstelės pasižymi pastebima fibrinolitine aktyvumu, kuris siejamas su padidėjusiu navikų formavimo potencialu. Palyginti su neapdorotomis HOS ląstelėmis, MNNG apdorotos ląstelės pasižymi stipresnėmis ląstelių agregacijos savybėmis ir didesniu polinkiu formuoti kolonijas minkštoje agaro terpėje, o tai koreliuoja su jų navikų formavimo gebėjimais. Eksperimentuose MNNG transformuotos ląstelės sukėlė navikus tiek nuogosioms pelėms, tiek žiurkėnams, o ląstelės buvo panašios į pirminę HOS liniją, tuo tarpu neapdorotos ląstelės panašiomis sąlygomis navikų nesukėlė.

Ši ląstelių linija taip pat yra naudinga tirti vėžio progresavimą ir navikų biologiją, ypač osteosarkomą, nes ji suteikia chemiškai indukuotos transformacijos modelį. Šių ląstelių gebėjimas augti imuninės sistemos sutrikimų turinčioje aplinkoje (pvz., nuogosiose pelėse) daro jas vertinga priemone ikiklinikiniams vėžio tyrimams, leidžiančia tirti navikų formavimo mechanizmus ir potencialiai išbandyti terapines intervencijas.

Audinys
Kaulas
Liga
Osteosarkoma
Sinonimai
  • MNNG/HOS
  • MNNG-HOS
  • HOS-MNNG
  • HOS/MNNG
  • MNNGHOS
  • MNNG/HOS (Cl#5)
  • MNNG/HOS Clone F-5
  • MNNG
  • R-1059-D
  • TE85
  • Te85
  • TE-85
  • HOS-TE85
  • Hos TE-85
  • HOS TE 85
  • HOS TE85
  • HOS (TE85)
  • HOS(TE85)
  • HOS (TE85
  • Clone F5)
  • MNNG-HOS (TE 85
  • clone F-5)
  • TE-85 clone F-5
  • HOS-Te85
  • TE 85.T
  • TE 85 ClF-5
  • TE-85 clone 5

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į fibroblastus panašus
Tumorogeninis
Taip, su nuogomis pelėmis

04Identifikatoriai

Nuoroda
MNNG-HOS (CL #5) (Cytion katalogo numeris 300289)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_0439

05Išraiška ir jautrumas

Izofermentai
G6PD, B

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
13 metų
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių