MNNG-HOS (CL #5)

Η κυτταρική σειρά MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] προέρχεται από την ανθρώπινη κυτταρική σειρά οστεοσαρκώματος HOS μέσω in vitro μετασχηματισμού με N-μεθυλ-N'-νιτρο-N-νιτροσογουανιδίνη (MNNG) σε συγκέντρωση 0,01 mcg/ml. Αυτή η ένωση είναι ένα ισχυρό καρκινογόνο και ο μετασχηματισμός είχε ως αποτέλεσμα σημαντικές ογκογόνες ιδιότητες, όπως αποδείχθηκε από τον σχηματισμό όγκων σε γυμνά ποντίκια εντός 21 ημερών με συχνότητα 100% όταν εμβολιάστηκαν υποδόρια με 10⁷ κύτταρα. Αυτοί οι όγκοι παρατηρήθηκαν ως κακώς διαφοροποιημένα σαρκώματα ή οστεοσαρκώματα. Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε αρχικά από μια 13χρονη λευκή ασθενή με οστεοσάρκωμα και παρουσιάζει ιδιότητες προσκολλητικής ανάπτυξης.

Λειτουργικά, τα κύτταρα MNNG/HOS Cl #5 παρουσιάζουν υψηλή πυκνότητα κορεσμού και υψηλή απόδοση επιμετάλλωσης σε μαλακό άγαρ, αντανακλώντας την ενισχυμένη ανεξάρτητη από την πρόσφυση ανάπτυξή τους, ένα χαρακτηριστικό γνώρισμα της κακοήθους μετασχηματισμού. Επιπλέον, αυτά τα κύτταρα παρουσιάζουν αξιοσημείωτη ινωδολυτική δραστηριότητα, η οποία έχει συσχετιστεί με αυξημένο ογκογόνο δυναμικό. Σε σύγκριση με τα μη επεξεργασμένα κύτταρα HOS, τα κύτταρα που έχουν υποστεί επεξεργασία με MNNG παρουσιάζουν πιο ισχυρές ιδιότητες συσσωμάτωσης κυττάρων και μεγαλύτερη τάση να σχηματίζουν αποικίες σε μαλακό άγαρ, κάτι που συσχετίζεται με την ικανότητά τους να σχηματίζουν όγκους. Σε πειράματα, τα κύτταρα που μετασχηματίστηκαν με MNNG παρήγαγαν όγκους τόσο σε γυμνά ποντίκια όσο και σε χάμστερ, με κύτταρα που μοιάζουν με τη μητρική σειρά HOS, ενώ τα μη επεξεργασμένα κύτταρα δεν ήταν ογκογόνα υπό παρόμοιες συνθήκες.

Αυτή η κυτταρική σειρά είναι επίσης χρήσιμη στη μελέτη της εξέλιξης του καρκίνου και της βιολογίας των όγκων, ιδιαίτερα του οστεοσαρκώματος, καθώς παρέχει ένα μοντέλο χημικά επαγόμενης μετασχηματισμού. Η ικανότητα αυτών των κυττάρων να αναπτύσσονται σε ένα ανοσοκατεσταλμένο περιβάλλον (π.χ. γυμνά ποντίκια) τα καθιστά ένα πολύτιμο εργαλείο για την προκλινική έρευνα του καρκίνου, επιτρέποντας τη διερεύνηση των ογκογόνων μηχανισμών και την πιθανή δοκιμή θεραπευτικών παρεμβάσεων.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης