MNNG-HOS (CL #5)

A linha celular MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] é derivada da linha celular de osteossarcoma humano HOS através da transformação in vitro com N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) a uma concentração de 0,01 mcg/ml. Este composto é um potente carcinogéneo, e a transformação resultou em propriedades tumorigénicas significativas, evidenciadas pela formação de tumores em ratos nude dentro de 21 dias com uma frequência de 100% quando inoculados subcutaneamente com 10⁷ células. Observou-se que estes tumores eram sarcomas ou osteossarcomas pouco diferenciados. A linha celular foi originalmente estabelecida a partir de uma paciente branca de 13 anos com osteossarcoma e exibe propriedades de crescimento aderente.

Funcionalmente, as células MNNG/HOS Cl #5 demonstram alta densidade de saturação e alta eficiência de plaqueamento em ágar mole, refletindo seu crescimento independente de ancoragem aprimorado, uma característica da transformação maligna. Além disso, essas células exibem notável atividade fibrinolítica, que tem sido associada ao aumento do potencial tumorigênico. Quando comparadas com células HOS não tratadas, as células tratadas com MNNG exibem propriedades de agregação celular mais robustas e uma maior propensão para formar colónias em ágar mole, o que se correlaciona com as suas capacidades de formação de tumores. Em experiências, as células transformadas com MNNG produziram tumores tanto em ratos nude como em hamsters, com células semelhantes à linha HOS parental, enquanto as células não tratadas não eram tumorigénicas em condições semelhantes.

Esta linha celular também é útil no estudo da progressão do cancro e da biologia tumoral, particularmente do osteossarcoma, pois fornece um modelo de transformação induzida quimicamente. A capacidade destas células de crescerem num ambiente imunocomprometido (por exemplo, ratos nude) torna-as uma ferramenta valiosa para a investigação pré-clínica do cancro, permitindo a investigação de mecanismos tumorigénicos e o teste potencial de intervenções terapêuticas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia