Preskoči na vsebino
MNNG-HOS (CL #5)
Tkivo
Kosti
Bolezen
Osteosarkom
Sinonimi
MNNG/HOS, MNNG-HOS, HOS-MNNG, HOS/MNNG, MNNGHOS, MNNG/HOS (Cl#5), MNNG/HOS Clone F-5, MNNG, R-1059-D, TE85, Te85, TE-85, HOS-TE85, Hos TE-85, HOS TE 85, HOS TE85, HOS (TE85), HOS(TE85), HOS (TE85, Clone F5), MNNG-HOS (TE 85, clone F-5), TE-85 clone F-5, HOS-Te85, TE 85.T, TE 85 ClF-5, TE-85 clone 5

Dokumenti

MNNG-HOS (CL #5)

Cell line · Številka izdelka 300289

The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Zaloga je majhna
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] izhaja iz človeške osteosarkomske celične linije HOS prek in vitro transformacije z N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinom (MNNG) v koncentraciji 0,01 mcg/ml. Ta spojina je močan karcinogen, transformacija pa je povzročila pomembne tumorogene lastnosti, kar dokazuje nastanek tumorjev pri golih miših v 21 dneh s 100-odstotno frekvenco, ko so bile subkutano inokulirane s 107 celicami. Opazili so, da so bili ti tumorji slabo diferencirani sarkomi ali osteosarkomi. Celična linija je bila prvotno vzpostavljena iz 13-letne bele pacientke z osteosarkomom in kaže adhezivne lastnosti rasti.

Funkcionalno celice MNNG/HOS Cl #5 kažejo visoko nasičenost in visoko učinkovitost pri nanosu na mehki agar, kar odraža njihovo povečano rast, neodvisno od pritrditve, kar je značilnost malignega preoblikovanja. Poleg tega te celice kažejo opazno fibrinolitično aktivnost, ki je povezana s povečanim tumorigenim potencialom. V primerjavi z neobdelanimi celicami HOS celice, obdelane z MNNG, kažejo močnejše lastnosti agregacije celic in večjo nagnjenost k tvorjenju kolonij v mehkem agarju, kar je povezano z njihovo sposobnostjo tvorjenja tumorjev. V poskusih so celice, transformirane z MNNG, povzročile tumorje tako pri golih miših kot pri hrčkih, pri čemer so celice spominjale na matično linijo HOS, medtem ko neobdelane celice v podobnih pogojih niso bile tumorogene.

Ta celična linija je uporabna tudi pri proučevanju napredovanja raka in biologije tumorjev, zlasti osteosarkoma, saj zagotavlja model kemično inducirane transformacije. Sposobnost teh celic, da rastejo v imunsko oslabljenem okolju (npr. golih miših), jih naredi dragoceno orodje za predklinične raziskave raka, saj omogočajo preučevanje tumorigenih mehanizmov in potencialno testiranje terapevtskih posegov.

Tkivo
Kosti
Bolezen
Osteosarkom
Sinonimi
  • MNNG/HOS
  • MNNG-HOS
  • HOS-MNNG
  • HOS/MNNG
  • MNNGHOS
  • MNNG/HOS (Cl#5)
  • MNNG/HOS Clone F-5
  • MNNG
  • R-1059-D
  • TE85
  • Te85
  • TE-85
  • HOS-TE85
  • Hos TE-85
  • HOS TE 85
  • HOS TE85
  • HOS (TE85)
  • HOS(TE85)
  • HOS (TE85
  • Clone F5)
  • MNNG-HOS (TE 85
  • clone F-5)
  • TE-85 clone F-5
  • HOS-Te85
  • TE 85.T
  • TE 85 ClF-5
  • TE-85 clone 5

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
MNNG-HOS (CL #5) (kataloška številka Cytion 300289)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0439

05Izražanje in dovzetnost

Izoenzimi
G6PD, B

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
13 let
Etnična pripadnost
Kavkaški