MNNG-HOS (CL #5)

MNNG/HOS Cl #5 rakuliin [R-1059-D] on saadud inimese osteosarkoomi rakuliinist HOS in vitro transformatsiooni teel N-metüül-N'-nitro-N-nitrosoguanidiiniga (MNNG) kontsentratsiooniga 0,01 mcg/ml. See ühend on tugev kantserogeen ja transformatsiooniga kaasnesid märkimisväärsed tuumorigeensed omadused, mida tõendas tuumorite tekkimine alasti hiirtel 21 päeva jooksul 100% sagedusega, kui neile süstiti naha alla 10⁷ rakku. Need tuumorid olid halvasti diferentseeritud sarkoomid või osteosarkoomid. Rakuliin loodi algselt 13-aastaselt valgenahalise naispatsiendilt, kellel oli osteosarkoom, ja see näitab adhesiivseid kasvamisomadusi.

Funktsionaalselt näitavad MNNG/HOS Cl #5 rakud pehme agaris kõrget küllastustihedust ja kõrget plaadistamise efektiivsust, mis peegeldab nende tugevdatud kinnitumissõltumatut kasvu, mis on pahaloomulise transformatsiooni tunnuseks. Lisaks näitavad need rakud märkimisväärset fibrinolüütilist aktiivsust, mis on seotud suurenenud kasvajate tekitamise potentsiaaliga. Võrreldes ravimata HOS-rakkudega, näitavad MNNG-ga ravitud rakud tugevamaid rakkude agregatsiooniomadusi ja suuremat kalduvust moodustada kolooniaid pehmes agaris, mis korreleerub nende kasvajate moodustamise võimega. Eksperimentides tekitasid MNNG-ga transformeeritud rakud kasvajaid nii alasti hiirtel kui ka hamstritel, kusjuures rakud sarnanesid emarakuga HOS, samas kui ravimata rakud ei olnud sarnastes tingimustes kasvajate tekitajad.

See rakuliin on kasulik ka vähi progressiooni ja kasvajate bioloogia uurimisel, eriti osteosarkoomi puhul, kuna see pakub keemiliselt indutseeritud transformatsiooni mudelit. Nende rakkude võime kasvada immuunpuudulikus keskkonnas (nt alasti hiirtel) muudab need väärtuslikuks vahendiks prekliinilises vähiuuringutes, võimaldades uurida kasvajate tekitamise mehhanisme ja potentsiaalselt testida ravivõimalusi.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest