MNNG-HOS (CL #5)

Az MNNG/HOS Cl #5 sejtvonal [R-1059-D] az emberi osteosarcoma sejtvonalból, a HOS-ból származik, amelyet in vitro transzformáltak N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidinnel (MNNG) 0,01 mcg/ml koncentrációban. Ez a vegyület erős rákkeltő anyag, és a transzformáció jelentős tumorigenikus tulajdonságokat eredményezett, amit bizonyít az, hogy 10⁷ sejt szubkután beoltása után 21 napon belül 100%-os gyakorisággal tumorok alakultak ki meztelen egerekben. Ezek a tumorok rosszul differenciált szarkómák vagy osteosarkómák voltak. A sejtvonalat eredetileg egy 13 éves, osteosarcomában szenvedő fehér bőrű női páciensből hozták létre, és adhezív növekedési tulajdonságokat mutat.

Funkcionálisan az MNNG/HOS Cl #5 sejtek magas telítettségi sűrűséget és magas lemezhatékonyságot mutatnak lágy agarban, ami tükrözi fokozott, rögzítésfüggetlen növekedésüket, amely a rosszindulatú transzformáció jellemzője. Ezenkívül ezek a sejtek jelentős fibrinolitikus aktivitást mutatnak, amely összefüggésbe hozható a megnövekedett tumorigenikus potenciállal. A kezeletlen HOS sejtekhez képest az MNNG-vel kezelt sejtek erőteljesebb sejtaggregációs tulajdonságokat és nagyobb hajlamot mutatnak a puha agaron történő kolóniaképzésre, ami összefüggésbe hozható tumorképző képességükkel. Kísérletek során az MNNG-vel transzformált sejtek mind meztelen egerekben, mind hörcsögökben tumorokat képeztek, amelyek a szülő HOS vonalhoz hasonló sejtek voltak, míg a kezeletlen sejtek hasonló körülmények között nem voltak tumorigenikusak.

Ez a sejtvonal a rák progressziójának és a tumorbiológia, különösen az osteosarcoma tanulmányozásában is hasznos, mivel kémiailag indukált transzformáció modelljét biztosítja. Ezeknek a sejteknek az immunhiányos környezetben (pl. meztelen egerekben) való növekedési képessége értékes eszközzé teszi őket a preklinikai rákkutatásban, lehetővé téve a tumorigenikus mechanizmusok vizsgálatát és a terápiás beavatkozások potenciális tesztelését.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban