MNNG-HOS (CL #5)

La linea cellulare MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] deriva dalla linea cellulare umana di osteosarcoma HOS attraverso la trasformazione in vitro con N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) ad una concentrazione di 0,01 mcg/ml. Questo composto è un potente cancerogeno e la trasformazione ha determinato significative proprietà tumorigeniche, evidenziate dalla formazione di tumori in topi nudi entro 21 giorni con una frequenza del 100% quando inoculati per via sottocutanea con 10⁷ cellule. Questi tumori sono stati osservati come sarcomi o osteosarcomi scarsamente differenziati. La linea cellulare è stata originariamente stabilita da una paziente bianca di 13 anni affetta da osteosarcoma e presenta proprietà di crescita aderente.

Dal punto di vista funzionale, le cellule MNNG/HOS Cl #5 dimostrano un'elevata densità di saturazione e un'elevata efficienza di piastratura in agar morbido, riflettendo la loro crescita indipendente dall'ancoraggio, un segno distintivo della trasformazione maligna. Inoltre, queste cellule mostrano una notevole attività fibrinolitica, che è stata associata ad un aumento del potenziale tumorigenico. Rispetto alle cellule HOS non trattate, le cellule trattate con MNNG mostrano proprietà di aggregazione cellulare più robuste e una maggiore propensione a formare colonie in agar morbido, il che è correlato alla loro capacità di formare tumori. Negli esperimenti, le cellule trasformate con MNNG hanno prodotto tumori sia nei topi nudi che nei criceti, con cellule simili alla linea HOS parentale, mentre le cellule non trattate non erano tumorigeniche in condizioni simili.

Questa linea cellulare è utile anche per lo studio della progressione del cancro e della biologia dei tumori, in particolare dell'osteosarcoma, poiché fornisce un modello di trasformazione indotta chimicamente. La capacità di queste cellule di crescere in un ambiente immunocompromesso (ad esempio, topi nudi) le rende uno strumento prezioso per la ricerca preclinica sul cancro, consentendo lo studio dei meccanismi tumorigenici e la potenziale sperimentazione di interventi terapeutici.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia