MNNG-HOS (CL #5)

MNNG/HOS Cl #5 -solulinja [R-1059-D] on peräisin ihmisen osteosarkoomasolulinjasta HOS, joka on muunnettu in vitro N-metyyli-N'-nitro-N-nitrosoguanidiinilla (MNNG) pitoisuudella 0,01 mcg/ml. Tämä yhdiste on voimakas karsinogeeni, ja transformaatio johti merkittäviin tuumorigeenisiin ominaisuuksiin, mikä todettiin 10⁷ solun subkutaanisen inokuloinnin jälkeen 21 päivän kuluessa alastomilla hiirillä 100 %:n esiintyvyydellä. Näiden tuumorien havaittiin olevan huonosti erilaistuneita sarkoomia tai osteosarkoomia. Solulinja perustettiin alun perin 13-vuotiaalta valkoiselta naispotilaalta, jolla oli osteosarkooma, ja se osoittaa adheesiivisia kasvuominaisuuksia.

Toiminnallisesti MNNG/HOS Cl #5 -solut osoittavat korkeaa saturaatiotiheyttä ja korkeaa levitystehokkuutta pehmeässä agaarissa, mikä heijastaa niiden parannettua kiinnittymisestä riippumatonta kasvua, joka on pahanlaatuisen muutoksen tunnusmerkki. Lisäksi nämä solut osoittavat huomattavaa fibrinolyyttistä aktiivisuutta, joka on yhdistetty lisääntyneeseen tuumorigeeniseen potentiaaliin. Verrattuna käsittelemättömiin HOS-soluihin MNNG-käsitellyt solut osoittavat vahvempia solujen aggregaatiominaisuuksia ja suurempaa taipumusta muodostaa pesäkkeitä pehmeässä agarissa, mikä korreloi niiden tuumorimuodostuskyvyn kanssa. Kokeissa MNNG-transformoidut solut tuottivat tuumoreita sekä alastomissa hiirissä että hamstereissa, ja solut muistuttivat emosolulinjaa HOS, kun taas käsittelemättömät solut eivät olleet tuumorigeenisiä samanlaisissa olosuhteissa.

Tämä solulinja on hyödyllinen myös syövän etenemisen ja kasvaimen biologian, erityisesti osteosarkooman, tutkimuksessa, koska se tarjoaa mallin kemiallisesti indusoidusta transformaatiosta. Näiden solujen kyky kasvaa immuunipuutteisessa ympäristössä (esim. alastomissa hiirissä) tekee niistä arvokkaan työkalun prekliinisessä syöpätutkimuksessa, sillä ne mahdollistavat kasvaimia aiheuttavien mekanismien tutkimisen ja terapeuttisten interventioiden potentiaalisen testaamisen.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa