İçeriğe atla
MNNG-HOS (CL #5)
Doku
Kemik
Hastalık
Osteosarkom
Eş anlamlılar
MNNG/HOS, MNNG-HOS, HOS-MNNG, HOS/MNNG, MNNGHOS, MNNG/HOS (Cl#5), MNNG/HOS Clone F-5, MNNG, R-1059-D, TE85, Te85, TE-85, HOS-TE85, Hos TE-85, HOS TE 85, HOS TE85, HOS (TE85), HOS(TE85), HOS (TE85, Clone F5), MNNG-HOS (TE 85, clone F-5), TE-85 clone F-5, HOS-Te85, TE 85.T, TE 85 ClF-5, TE-85 clone 5

MNNG-HOS (CL #5)

Cell line · Ürün numarası 300289

The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stok az
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MNNG/HOS Cl #5 hücre hattı [R-1059-D], 0,01 mcg/ml konsantrasyonda N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidin (MNNG) ile in vitro transformasyon yoluyla insan osteosarkom hücre hattı HOS'tan türetilmiştir. Bu bileşik güçlü bir kanserojendir ve transformasyon, 107 hücre ile deri altına aşılandığında 21 gün içinde çıplak farelerde %100 sıklıkta tümör oluşumu ile kanıtlanan önemli tümörojenik özelliklere yol açmıştır. Bu tümörlerin zayıf farklılaşmış sarkomlar veya osteosarkomlar olduğu gözlemlenmiştir. Hücre hattı, osteosarkomlu 13 yaşındaki beyaz bir kadın hastadan oluşturulmuştur ve yapışkan büyüme özellikleri sergilemektedir.

İşlevsel olarak, MNNG/HOS Cl #5 hücreleri, malign transformasyonun bir özelliği olan, bağlantıdan bağımsız büyümenin artmasını yansıtan, yumuşak agar içinde yüksek doygunluk yoğunluğu ve yüksek plaklama verimliliği gösterir. Ek olarak, bu hücreler, tümör oluşturma potansiyelinin artmasıyla ilişkilendirilen, dikkate değer fibrinolitik aktivite sergiler. Tedavi edilmemiş HOS hücreleriyle karşılaştırıldığında, MNNG ile tedavi edilmiş hücreler daha güçlü hücre agregasyon özellikleri ve yumuşak agar içinde koloni oluşturma eğilimi gösterir, bu da tümör oluşturma yetenekleriyle ilişkilidir. Deneylerde, MNNG ile dönüştürülmüş hücreler hem çıplak farelerde hem de hamsterlarda tümörler oluştururken, hücreler ana HOS hattına benziyordu, ancak tedavi edilmemiş hücreler benzer koşullar altında tümör oluşturmuyordu.

Bu hücre hattı, kimyasal olarak indüklenen transformasyon modeli sağladığı için, kanser ilerlemesi ve tümör biyolojisi, özellikle osteosarkomun incelenmesinde de yararlıdır. Bu hücrelerin bağışıklık sistemi zayıflamış bir ortamda (örneğin, çıplak fareler) büyüme yeteneği, onları preklinik kanser araştırmaları için değerli bir araç haline getirir ve tümör oluşturma mekanizmalarının araştırılmasına ve terapötik müdahalelerin potansiyel olarak test edilmesine olanak tanır.

Doku
Kemik
Hastalık
Osteosarkom
Eş anlamlılar
  • MNNG/HOS
  • MNNG-HOS
  • HOS-MNNG
  • HOS/MNNG
  • MNNGHOS
  • MNNG/HOS (Cl#5)
  • MNNG/HOS Clone F-5
  • MNNG
  • R-1059-D
  • TE85
  • Te85
  • TE-85
  • HOS-TE85
  • Hos TE-85
  • HOS TE 85
  • HOS TE85
  • HOS (TE85)
  • HOS(TE85)
  • HOS (TE85
  • Clone F5)
  • MNNG-HOS (TE 85
  • clone F-5)
  • TE-85 clone F-5
  • HOS-Te85
  • TE 85.T
  • TE 85 ClF-5
  • TE-85 clone 5

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, çıplak farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MNNG-HOS (CL #5) (Cytion katalog numarası 300289)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0439

05İfade ve duyarlılık

İzoenzimler
G6PD, B

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
13 yıl
Etnik köken
Kafkas