Перейти до вмісту
MNNG-HOS (CL #5)
Тканина
Кость
Хвороба
Остеосаркома
Синоніми
MNNG/HOS, MNNG-HOS, HOS-MNNG, HOS/MNNG, MNNGHOS, MNNG/HOS (Cl#5), MNNG/HOS Clone F-5, MNNG, R-1059-D, TE85, Te85, TE-85, HOS-TE85, Hos TE-85, HOS TE 85, HOS TE85, HOS (TE85), HOS(TE85), HOS (TE85, Clone F5), MNNG-HOS (TE 85, clone F-5), TE-85 clone F-5, HOS-Te85, TE 85.T, TE 85 ClF-5, TE-85 clone 5

Документи

MNNG-HOS (CL #5)

Cell line · Номер товару 300289

The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...

€550.00без урахування податків та вартості доставки
Запаси на складі на межі вичерпання
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] походить від клітинної лінії людської остеосаркоми HOS шляхом in vitro трансформації за допомогою N-метил-N'-нітро-N-нітрозогуанідину (MNNG) у концентрації 0,01 мкг/мл. Ця сполука є потужним канцерогеном, і трансформація призвела до значних пухлиногенних властивостей, про що свідчить утворення пухлин у голих мишей протягом 21 дня з частотою 100 % при підшкірному введенні 107 клітин. Ці пухлини були слабо диференційованими саркомами або остеосаркомами. Клітинна лінія була спочатку створена з 13-річної пацієнтки білої раси з остеосаркомою і виявляє властивості адгезивного росту.

Функціонально клітини MNNG/HOS Cl #5 демонструють високу щільність насичення та високу ефективність плакування в м'якому агарі, що відображає їх посилений незалежний від закріплення ріст, характерну ознаку злоякісної трансформації. Крім того, ці клітини виявляють помітну фібринолітичну активність, яка пов'язана з підвищеним пухлиногенним потенціалом. У порівнянні з необробленими клітинами HOS, клітини, оброблені MNNG, виявляють більш стійкі властивості агрегації клітин і більшу схильність до утворення колоній у м'якому агарі, що корелює з їхніми пухлиноутворюючими здібностями. В експериментах клітини, трансформовані MNNG, утворювали пухлини як у голих мишей, так і в хом'яків, причому клітини нагадували батьківську лінію HOS, тоді як необроблені клітини в подібних умовах не були пухлиногенними.

Ця клітинна лінія також корисна для вивчення прогресування раку та біології пухлин, зокрема остеосаркоми, оскільки вона забезпечує модель хімічно індукованої трансформації. Здатність цих клітин рости в імунокомпрометованому середовищі (наприклад, у голих мишей) робить їх цінним інструментом для доклінічних досліджень раку, дозволяючи досліджувати пухлиногенні механізми та потенційно тестувати терапевтичні втручання.

Тканина
Кость
Хвороба
Остеосаркома
Синоніми
  • MNNG/HOS
  • MNNG-HOS
  • HOS-MNNG
  • HOS/MNNG
  • MNNGHOS
  • MNNG/HOS (Cl#5)
  • MNNG/HOS Clone F-5
  • MNNG
  • R-1059-D
  • TE85
  • Te85
  • TE-85
  • HOS-TE85
  • Hos TE-85
  • HOS TE 85
  • HOS TE85
  • HOS (TE85)
  • HOS(TE85)
  • HOS (TE85
  • Clone F5)
  • MNNG-HOS (TE 85
  • clone F-5)
  • TE-85 clone F-5
  • HOS-Te85
  • TE 85.T
  • TE 85 ClF-5
  • TE-85 clone 5

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробластоподібні
Пухлиноутворювальний
Так, у голих мишей

04Ідентифікатори

Посилання
MNNG-HOS (CL #5) (каталожний номер 300289)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0439

05Експресія та сприйнятливість

Ізоферменти
G6PD, B

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
1 x 104 клітин/см2
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
13 років
Етнічна приналежність
Кавказець