MNNG-HOS (CL #5)

MNNG/HOS Cl #5-cellelinjen [R-1059-D] er avledet fra den humane osteosarkomcellelinjen HOS gjennom in vitro-transformasjon med N-metyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) i en konsentrasjon på 0,01 mcg/ml. Dette stoffet er et kraftig kreftfremkallende middel, og transformasjonen resulterte i betydelige tumorigeniske egenskaper, noe som ble påvist ved dannelsen av svulster hos nakne mus innen 21 dager med en frekvens på 100 % når de ble inokulert subkutant med 10⁷ celler. Disse svulstene ble observert å være dårlig differensierte sarkomer eller osteosarkomer. Cellelinjen ble opprinnelig etablert fra en 13 år gammel hvit kvinnelig pasient med osteosarkom og viser vedheftende vekstegenskaper.

Funksjonelt viser MNNG/HOS Cl #5-celler høy metningsdensitet og høy platingeffektivitet i myk agar, noe som gjenspeiler deres forbedrede forankringsuavhengige vekst, et kjennetegn på ondartet transformasjon. I tillegg viser disse cellene bemerkelsesverdig fibrinolytisk aktivitet, som har vært assosiert med økt tumorigenisk potensial. Sammenlignet med ubehandlede HOS-celler viser MNNG-behandlede celler mer robuste celleaggregeringsegenskaper og en høyere tilbøyelighet til å danne kolonier i myk agar, noe som korrelerer med deres tumorformende evner. I eksperimenter produserte MNNG-transformerte celler tumorer i både nakne mus og hamstere, med celler som lignet den opprinnelige HOS-linjen, mens ubehandlede celler var ikke-tumorigeniske under lignende forhold.

Denne cellelinjen er også nyttig i studiet av kreftprogresjon og tumorbiologi, særlig osteosarkom, da den gir en modell for kjemisk indusert transformasjon. Evnen til disse cellene til å vokse i et immunsvekket miljø (f.eks. nakenmus) gjør dem til et verdifullt verktøy for preklinisk kreftforskning, og muliggjør undersøkelse av tumorigeniske mekanismer og potensiell testing av terapeutiske intervensjoner.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring