MNNG-HOS (CL #5)

Dòng tế bào MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] được tạo ra từ dòng tế bào ung thư xương người HOS thông qua quá trình biến đổi in vitro bằng N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) với nồng độ 0,01 mcg/ml. Hợp chất này là một chất gây ung thư mạnh, và quá trình biến đổi đã dẫn đến các đặc tính gây ung thư đáng kể, được thể hiện qua việc hình thành khối u ở chuột nude trong vòng 21 ngày với tần suất 100% khi tiêm dưới da 10^⁷ tế bào. Các khối u này được quan sát là sarcoma hoặc osteosarcoma kém biệt hóa. Dòng tế bào ban đầu được thiết lập từ một bệnh nhân nữ da trắng 13 tuổi bị u xương và có đặc tính phát triển bám dính.

Về mặt chức năng, các tế bào MNNG/HOS Cl #5 thể hiện mật độ bão hòa cao và hiệu suất gieo tế bào cao trong agar mềm, phản ánh khả năng phát triển độc lập với bề mặt tăng cường, một đặc trưng của quá trình biến đổi ác tính. Ngoài ra, các tế bào này thể hiện hoạt tính fibrinolytic đáng kể, được liên kết với tiềm năng gây ung thư tăng cao. So với các tế bào HOS chưa được xử lý, các tế bào được xử lý bằng MNNG có khả năng tập hợp tế bào mạnh mẽ hơn và xu hướng hình thành các khối u cao hơn trong agar mềm, điều này tương quan với khả năng hình thành khối u của chúng. Trong các thí nghiệm, các tế bào được biến đổi bằng MNNG đã sản sinh khối u ở cả chuột nude và chuột hamster, với các tế bào có đặc điểm tương tự như dòng tế bào HOS ban đầu, trong khi các tế bào chưa được xử lý không có khả năng gây ung thư trong điều kiện tương tự.

Dòng tế bào này cũng hữu ích trong nghiên cứu tiến triển ung thư và sinh học khối u, đặc biệt là ung thư xương, vì nó cung cấp một mô hình biến đổi do hóa chất gây ra. Khả năng của các tế bào này phát triển trong môi trường suy giảm miễn dịch (ví dụ: chuột nude) khiến chúng trở thành công cụ quý giá cho nghiên cứu ung thư tiền lâm sàng, cho phép điều tra các cơ chế gây ung thư và thử nghiệm các can thiệp điều trị tiềm năng.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.