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MNNG-HOS (CL #5)
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MNNG-HOS (CL #5)

Cell line · 제품 번호 300289

The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...

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사용자 지정 / 추천 사항

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롯
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1

01일반 정보

설명

MNNG/HOS Cl #5 세포주 [R-1059-D]는 인간 골육종 세포주 HOS를 N-메틸-N'-니트로-N-니트로소구아니딘(MNNG) 0.01 mcg/ml 농도로 체외 변형시켜 유도한 것이다. 이 화합물은 강력한 발암물질이며, 변형 결과 107개의 세포를 피하 접종했을 때 21일 이내에 누드 마우스에서 100% 빈도로 종양이 형성되는 것으로 입증된 상당한 종양 유발 특성을 나타냈습니다. 이러한 종양은 저분화 육종 또는 골육종으로 관찰되었습니다. 이 세포주는 원래 골육종을 앓고 있던 13세의 백인 여성 환자로부터 설립되었으며, 접착성 성장 특성을 나타냅니다.

기능적으로, MNNG/HOS Cl #5 세포는 연한 한천 배지에서 높은 포화 밀도와 높은 접종 효율을 보이며, 이는 악성 변형의 특징인 강화된 부착 독립적 성장 능력을 반영한다. 또한 이 세포들은 종양 유발 잠재력 증가와 연관된 주목할 만한 섬유소 용해 활성을 나타낸다. 미처리 HOS 세포와 비교했을 때, MNNG 처리 세포는 더 강력한 세포 응집 특성과 연한 한천에서 콜로니 형성 경향이 높아, 이는 종양 형성 능력과 상관관계가 있습니다. 실험에서 MNNG 변형 세포는 누드 마우스와 햄스터 모두에서 종양을 생성했으며, 세포는 모세포인 HOS 계통과 유사한 반면, 미처리 세포는 유사한 조건에서 종양 형성 능력이 없었습니다.

이 세포주는 화학적으로 유도된 변형 모델을 제공하므로 암 진행 및 종양 생물학, 특히 골육종 연구에도 유용합니다. 이러한 세포가 면역결핍 환경(예: 누드 마우스)에서 성장할 수 있는 능력은 종양 유발 메커니즘 연구 및 치료적 개입 가능성 시험을 가능하게 하여 전임상 암 연구에 가치 있는 도구로 작용합니다.

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02분류

생물체
인간
성
여성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
섬유아세포 유사
종양 유발성
예, 누드 마우스에서

04식별자

인용
MNNG-HOS(CL #5)(사이티온 카탈로그 번호 300289)
NCBI 세금 식별번호
9606
셀로사우루스
CVCL_0439

05발현 및 감수성

이소효소
G6PD, B

06취급 및 배양

배지
RPMI 1640, w: 2.0mM 안정 글루타민, w: 2.0g/L NaHCO3(사이티온 제품 번호 820700a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
1 x 10⁴ 세포/cm²
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

기증자 연령
13년
민족
백인