.jpg)
- Tisu
- Tulang
- Penyakit
- Osteosarkoma
- Sinonim
- MNNG/HOS, MNNG-HOS, HOS-MNNG, HOS/MNNG, MNNGHOS, MNNG/HOS (Cl#5), MNNG/HOS Clone F-5, MNNG, R-1059-D, TE85, Te85, TE-85, HOS-TE85, Hos TE-85, HOS TE 85, HOS TE85, HOS (TE85), HOS(TE85), HOS (TE85, Clone F5), MNNG-HOS (TE 85, clone F-5), TE-85 clone F-5, HOS-Te85, TE 85.T, TE 85 ClF-5, TE-85 clone 5
Dokumen
MNNG-HOS (CL #5)
Cell line · Nomor produk 300289
The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...
Penyesuaian / Rekomendasi
- MNNG-HOS (CL #5)Cell line€550.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Baris sel MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] berasal dari baris sel osteosarcoma manusia HOS melalui transformasi in vitro dengan N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) pada konsentrasi 0,01 mcg/ml. Senyawa ini merupakan karsinogen yang kuat, dan transformasi tersebut menghasilkan sifat tumorigenik yang signifikan, dibuktikan dengan pembentukan tumor pada tikus nude dalam waktu 21 hari dengan frekuensi 100% saat disuntikkan secara subkutan dengan 10⁷ sel. Tumor-tumor tersebut diamati sebagai sarkoma atau osteosarkoma yang kurang terdiferensiasi. Baris sel ini awalnya didirikan dari pasien perempuan kulit putih berusia 13 tahun dengan osteosarcoma dan menunjukkan sifat pertumbuhan yang melekat.
Secara fungsional, sel MNNG/HOS Cl #5 menunjukkan kepadatan saturasi tinggi dan efisiensi penanaman tinggi dalam agar lunak, mencerminkan pertumbuhan independen dari adhesi yang ditingkatkan, ciri khas transformasi ganas. Selain itu, sel-sel ini menunjukkan aktivitas fibrinolitik yang menonjol, yang terkait dengan potensi tumorigenik yang meningkat. Dibandingkan dengan sel HOS yang tidak diobati, sel yang diobati dengan MNNG menunjukkan sifat agregasi sel yang lebih kuat dan kecenderungan yang lebih tinggi untuk membentuk koloni dalam agar lunak, yang berkorelasi dengan kemampuan mereka untuk membentuk tumor. Dalam eksperimen, sel yang diubah dengan MNNG menghasilkan tumor pada tikus nude dan hamster, dengan sel yang menyerupai garis sel HOS induk, sementara sel yang tidak diobati tidak tumorigenik dalam kondisi serupa.
Lini sel ini juga berguna dalam mempelajari progresivitas kanker dan biologi tumor, terutama osteosarcoma, karena menyediakan model transformasi yang diinduksi secara kimia. Kemampuan sel-sel ini untuk tumbuh dalam lingkungan imunokompromais (misalnya, tikus nude) menjadikannya alat yang berharga untuk penelitian kanker praklinis, memungkinkan penyelidikan mekanisme tumorigenik dan pengujian potensial intervensi terapeutik.
- Tisu
- Tulang
- Penyakit
- Osteosarkoma
- Sinonim
- MNNG/HOS
- MNNG-HOS
- HOS-MNNG
- HOS/MNNG
- MNNGHOS
- MNNG/HOS (Cl#5)
- MNNG/HOS Clone F-5
- MNNG
- R-1059-D
- TE85
- Te85
- TE-85
- HOS-TE85
- Hos TE-85
- HOS TE 85
- HOS TE85
- HOS (TE85)
- HOS(TE85)
- HOS (TE85
- Clone F5)
- MNNG-HOS (TE 85
- clone F-5)
- TE-85 clone F-5
- HOS-Te85
- TE 85.T
- TE 85 ClF-5
- TE-85 clone 5
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Perempuan
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti fibroblast
- Tumorigenik
- Ya, pada tikus telanjang
04Pengidentifikasi
- Referensi
- MNNG-HOS (CL #5) (Nomor katalog Cytion 300289)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0439
05Ekspresi dan kerentanan
- Isoenzim
- G6PD, B
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Kepadatan penanaman
- 1 x 10⁴ sel/cm²
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pemulihan pasca-pencairan
- Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Usia donor
- 13 tahun
- Etnis
- Kaukasia
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya