MNNG-HOS (CL #5)

La línea celular MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] se deriva de la línea celular de osteosarcoma humano HOS mediante transformación in vitro con N-metil-N'-nitro-N-nitrosoguanidina (MNNG) a una concentración de 0,01 mcg/ml. Este compuesto es un potente carcinógeno, y la transformación dio lugar a importantes propiedades tumorigénicas, evidenciadas por la formación de tumores en ratones desnudos en un plazo de 21 días con una frecuencia del 100 % cuando se inocularon subcutáneamente con 10⁷ células. Se observó que estos tumores eran sarcomas u osteosarcomas poco diferenciados. La línea celular se estableció originalmente a partir de una paciente blanca de 13 años con osteosarcoma y presenta propiedades de crecimiento adherente.

Funcionalmente, las células MNNG/HOS Cl #5 muestran una alta densidad de saturación y una alta eficiencia de placas en agar blando, lo que refleja su mayor crecimiento independiente del anclaje, un rasgo distintivo de la transformación maligna. Además, estas células muestran una notable actividad fibrinolítica, que se ha asociado con un mayor potencial tumorigénico. En comparación con las células HOS no tratadas, las células tratadas con MNNG muestran propiedades de agregación celular más robustas y una mayor propensión a formar colonias en agar blando, lo que se correlaciona con su capacidad de formar tumores. En los experimentos, las células transformadas con MNNG produjeron tumores tanto en ratones desnudos como en hámsters, con células similares a la línea HOS parental, mientras que las células no tratadas no fueron tumorigénicas en condiciones similares.

Esta línea celular también es útil para estudiar la progresión del cáncer y la biología tumoral, en particular el osteosarcoma, ya que proporciona un modelo de transformación inducida químicamente. La capacidad de estas células para crecer en un entorno inmunodeprimido (por ejemplo, ratones desnudos) las convierte en una herramienta valiosa para la investigación preclínica del cáncer, ya que permite investigar los mecanismos tumorigénicos y probar posibles intervenciones terapéuticas.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía