MNNG-HOS (CL #5)

MNNG/HOS Cl #5 šūnu līnija [R-1059-D] ir iegūta no cilvēka osteosarkomas šūnu līnijas HOS, izmantojot in vitro transformāciju ar N-metil-N'-nitro-N-nitrozoguanidīnu (MNNG) koncentrācijā 0,01 mcg/ml. Šis savienojums ir spēcīgs kancerogēns, un transformācija izraisīja nozīmīgas tumorogēnas īpašības, ko pierāda audzēju veidošanās kailām pelēm 21 dienu laikā ar 100 % biežumu, kad tām subkutāni inokulēja 10⁷ šūnas. Šie audzēji bija slikti diferencēti sarkomi vai osteosarkomi. Šūnu līnija sākotnēji tika izveidota no 13 gadus vecas baltas sievietes pacienta ar osteosarkomu un uzrāda adhezīvas augšanas īpašības.

Funkcionāli MNNG/HOS Cl #5 šūnas uzrāda augstu piesātinājuma blīvumu un augstu plākšņu efektivitāti mīkstā agārā, atspoguļojot to uzlaboto noenkurošanās neatkarīgo augšanu, kas ir ļaundabīgas transformācijas pazīme. Turklāt šīs šūnas uzrāda ievērojamu fibrinolītisko aktivitāti, kas saistīta ar palielinātu tumorogēno potenciālu. Salīdzinot ar neapstrādātām HOS šūnām, MNNG apstrādātās šūnas izrāda spēcīgākas šūnu agregācijas īpašības un lielāku tendence veidot kolonijas mīkstā agārā, kas korelē ar to audzēju veidošanas spējām. Eksperimentos MNNG transformētās šūnas radīja audzējus gan kailām pelēm, gan kāmjiem, šūnas atgādinot vecāku HOS līniju, savukārt neapstrādātās šūnas līdzīgos apstākļos nebija tumorogēnas.

Šī šūnu līnija ir noderīga arī vēža progresijas un audzēju bioloģijas pētījumos, jo īpaši osteosarkomas gadījumā, jo tā nodrošina ķīmiski inducētas transformācijas modeli. Šo šūnu spēja augt imūndeficītas vides apstākļos (piemēram, kailām pelēm) padara tās par vērtīgu instrumentu pirmsklīniskajos vēža pētījumos, ļaujot izpētīt tumorogēniskos mehānismus un potenciāli testēt terapeitiskas intervences.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu