MNNG-HOS (CL #5)

Linia komórkowa MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] pochodzi z ludzkiej linii komórkowej osteosarcoma HOS poprzez transformację in vitro za pomocą N-metylo-N'-nitro-N-nitrozoguanidyny (MNNG) w stężeniu 0,01 mcg/ml. Związek ten jest silnym czynnikiem rakotwórczym, a transformacja spowodowała znaczne właściwości nowotworowe, czego dowodem jest powstawanie nowotworów u myszy nagich w ciągu 21 dni z częstotliwością 100% po podskórnym zaszczepieniu 10⁷ komórek. Nowotwory te były słabo zróżnicowanymi mięsakami lub osteosarcomami. Linia komórkowa została pierwotnie ustanowiona na podstawie 13-letniej białej pacjentki z osteosarcomą i wykazuje właściwości wzrostu adhezyjnego.

Pod względem funkcjonalnym komórki MNNG/HOS Cl #5 wykazują wysoką gęstość nasycenia i wysoką wydajność posiewu w miękkim agarze, co odzwierciedla ich zwiększony wzrost niezależny od zakotwiczenia, charakterystyczny dla transformacji nowotworowej. Ponadto komórki te wykazują znaczną aktywność fibrynolityczną, która jest związana ze zwiększonym potencjałem nowotworowym. W porównaniu z komórkami HOS niepoddanymi działaniu MNNG, komórki poddane działaniu MNNG wykazują silniejsze właściwości agregacji komórkowej i większą skłonność do tworzenia kolonii w miękkiej agarze, co koreluje z ich zdolnością do tworzenia nowotworów. W eksperymentach komórki transformowane MNNG wytworzyły nowotwory zarówno u myszy nagich, jak i chomików, przy czym komórki przypominały linię macierzystą HOS, podczas gdy komórki niepoddane działaniu MNNG nie wykazywały właściwości nowotworowych w podobnych warunkach.

Linia komórkowa ta jest również przydatna w badaniach nad progresją nowotworów i biologią nowotworów, w szczególności osteosarcoma, ponieważ stanowi model transformacji wywołanej chemicznie. Zdolność tych komórek do wzrostu w środowisku z obniżoną odpornością (np. u myszy nagich) sprawia, że są one cennym narzędziem w przedklinicznych badaniach nad rakiem, umożliwiającym badanie mechanizmów nowotworowych i potencjalne testowanie interwencji terapeutycznych.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym