.jpg)
- Tissue
- עצם
- Disease
- אוסטאוסרקומה
- Synonyms
- MNNG/HOS, MNNG-HOS, HOS-MNNG, HOS/MNNG, MNNGHOS, MNNG/HOS (Cl#5), MNNG/HOS Clone F-5, MNNG, R-1059-D, TE85, Te85, TE-85, HOS-TE85, Hos TE-85, HOS TE 85, HOS TE85, HOS (TE85), HOS(TE85), HOS (TE85, Clone F5), MNNG-HOS (TE 85, clone F-5), TE-85 clone F-5, HOS-Te85, TE 85.T, TE 85 ClF-5, TE-85 clone 5
Documents
MNNG-HOS (CL #5)
Cell line · Product number 300289
The MNNG/HOS Cl #5 cell line [R-1059-D] is derived from the human osteosarcoma cell line HOS through in vitro transformation with N-methyl-N'-nitro-N-nitr...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים MNNG/HOS Cl #5 [R-1059-D] נגזר מקו התאים האנושי HOS של אוסטאוסרקומה באמצעות שינוי במבחנה עם N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine (MNNG) בריכוז של 0.01 mcg/ml. תרכובת זו היא חומר מסרטן חזק, והטרנספורמציה הביאה לתכונות טומורגניות משמעותיות, כפי שמעיד היווצרות גידולים בעכברים עירומים תוך 21 יום בתדירות של 100% כאשר הוחדר תת-עורית 107 תאים. גידולים אלה נצפו כסרקומות או אוסטאוסרקומות מובחנות גרוע. קו התאים הוקם במקור מחולה לבנה בת 13 עם אוסטאוסרקומה, והוא מפגין תכונות צמיחה דבקות.
מבחינה תפקודית, תאי MNNG/HOS Cl #5 מפגינים צפיפות רוויה גבוהה ויעילות צלחת גבוהה באגר רך, המשקפים את צמיחתם המשופרת ללא תלות בעוגן, סימן היכר של שינוי ממאיר. בנוסף, תאים אלה מפגינים פעילות פיברינוליטית בולטת, הקשורה לפוטנציאל ממאיר מוגבר. בהשוואה לתאי HOS שלא טופלו, תאים שטופלו ב-MNNG מציגים תכונות צבירת תאים חזקות יותר ונטייה גבוהה יותר ליצירת מושבות באגר רך, מה שמתאים ליכולותיהם ליצור גידולים. בניסויים, תאים שעברו שינוי MNNG יצרו גידולים בעכברים עירומים ובאוגרים, עם תאים הדומים לקו HOS המקורי, בעוד שתאים שלא טופלו לא היו סרטניים בתנאים דומים.
קו תאים זה שימושי גם בחקר התקדמות הסרטן וביולוגיה של גידולים, במיוחד אוסטאוסרקומה, מכיוון שהוא מספק מודל של שינוי המושרה כימית. היכולת של תאים אלה לגדול בסביבה עם מערכת חיסונית מוחלשת (למשל, עכברים עירומים) הופכת אותם לכלי חשוב במחקר פרה-קליני של סרטן, ומאפשרת לחקור מנגנונים סרטניים ולבדוק התערבויות טיפוליות פוטנציאליות.
- Tissue
- עצם
- Disease
- אוסטאוסרקומה
- Synonyms
- MNNG/HOS
- MNNG-HOS
- HOS-MNNG
- HOS/MNNG
- MNNGHOS
- MNNG/HOS (Cl#5)
- MNNG/HOS Clone F-5
- MNNG
- R-1059-D
- TE85
- Te85
- TE-85
- HOS-TE85
- Hos TE-85
- HOS TE 85
- HOS TE85
- HOS (TE85)
- HOS(TE85)
- HOS (TE85
- Clone F5)
- MNNG-HOS (TE 85
- clone F-5)
- TE-85 clone F-5
- HOS-Te85
- TE 85.T
- TE 85 ClF-5
- TE-85 clone 5
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי פיברובלסט
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
04Identifiers
- Citation
- MNNG-HOS (CL #5) (מספר קטלוגי Cytion 300289)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0439
05Expression and susceptibility
- Isoenzymes
- G6PD, B
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 13 שנים
- Ethnicity
- קווקזי
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes