MNNG-HOS (CL #5)

MNNG/HOS Cl #5-cellelinjen [R-1059-D] stammer fra den humane osteosarkomcellelinje HOS gennem in vitro-transformation med N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidin (MNNG) i en koncentration på 0,01 mcg/ml. Dette stof er et potent kræftfremkaldende stof, og transformationen resulterede i betydelige tumorigeniske egenskaber, hvilket blev påvist ved dannelsen af tumorer i nude-mus inden for 21 dage med en frekvens på 100 %, når de blev inokuleret subkutant med 10⁷ celler. Disse tumorer blev observeret som dårligt differentierede sarkomer eller osteosarkomer. Cellelinjen blev oprindeligt etableret fra en 13-årig hvid kvindelig patient med osteosarkom og udviser adhæsive vækstegenskaber.

Funktionelt udviser MNNG/HOS Cl #5-celler høj mætningsdensitet og høj platingeffektivitet i blød agar, hvilket afspejler deres forbedrede forankringsuafhængige vækst, et kendetegn for malign transformation. Derudover udviser disse celler en bemærkelsesværdig fibrinolytisk aktivitet, som har været forbundet med øget tumorigenisk potentiale. Sammenlignet med ubehandlede HOS-celler udviser MNNG-behandlede celler mere robuste celleaggregeringsegenskaber og en højere tilbøjelighed til at danne kolonier i blød agar, hvilket korrelerer med deres tumorformende evner. I eksperimenter producerede MNNG-transformerede celler tumorer i både nude-mus og hamstere, med celler der lignede den oprindelige HOS-linje, mens ubehandlede celler var ikke-tumorigeniske under lignende betingelser.

Denne cellelinje er også nyttig i studiet af kræftprogression og tumorbiologi, især osteosarkom, da den giver en model for kemisk induceret transformation. Disse cellers evne til at vokse i et immunforsvaret miljø (f.eks. nude-mus) gør dem til et værdifuldt redskab i præklinisk kræftforskning, da de muliggør undersøgelse af tumorigeniske mekanismer og potentiel afprøvning af terapeutiske interventioner.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring