MNNG-HOS (CL #5)

MNNG/HOS Cl #5 細胞株 [R-1059-D] は、ヒト骨肉腫細胞株 HOS を、0.01 μg/ml の濃度の N-メチル-N'-ニトロ-N-ニトロソグアニジン（MNNG）による in vitro 形質転換によって樹立したものである。 この化合物は強力な発癌物質であり、10^7個の細胞を皮下接種した場合、21日以内にヌードマウスに100%の頻度で腫瘍が形成されることから、この形質転換により顕著な腫瘍形成能が得られたことが証明された。これらの腫瘍は低分化型肉腫または骨肉腫であることが確認された。 この細胞株は、骨肉腫を患った13歳の白人女性患者から樹立されたもので、接着性増殖特性を示す。

機能面では、MNNG/HOS Cl #5細胞は軟寒天培地において高い飽和密度と高い播種効率を示し、悪性形質転換の特徴である増強された接着非依存性増殖を反映している。さらに、これらの細胞は顕著な線溶活性を示し、これは腫瘍形成能の増強と関連している。 未処理HOS細胞と比較して、MNNG処理細胞はより強力な細胞凝集特性を示し、軟寒天培地でのコロニー形成傾向が高く、これは腫瘍形成能力と相関する。実験では、MNNG形質転換細胞はヌードマウスとハムスターの両方で腫瘍を形成し、親株HOS細胞に類似した細胞を示した。一方、未処理細胞は同様の条件下では非腫瘍形成性であった。

この細胞株は化学誘発性形質転換モデルを提供するため、特に骨肉腫における癌進行と腫瘍生物学の研究にも有用である。免疫不全環境（例：ヌードマウス）での増殖能力により、腫瘍形成メカニズムの解明や治療介入の可能性を検証できる前臨床癌研究の貴重なツールとなっている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。