NCI-H69AR

NCI-H69AR est un dérivé multirésistant de la lignée cellulaire parentale de carcinome pulmonaire à petites cellules (CPPC) NCI-H69. Elle a été développée par une sélection continue dans des concentrations croissantes d'agents chimiothérapeutiques tels que la doxorubicine. Par conséquent, NCI-H69AR sert de système modèle clé pour l'étude des mécanismes de résistance acquise aux médicaments dans le SCLC. Cette lignée cellulaire conserve de nombreuses caractéristiques morphologiques et biochimiques de sa lignée parentale, mais présente une résistance profonde à plusieurs agents cytotoxiques, ce qui la rend particulièrement pertinente pour l'étude des voies de résistance médiées par l'efflux.

Le principal mécanisme de résistance de NCI-H69AR implique la surexpression de la protéine de résistance multidrogue P-glycoprotéine (P-gp), codée par le gène MDR1. La P-gp fonctionne comme une pompe d'efflux ATP-dépendante qui réduit l'accumulation intracellulaire de médicaments, en particulier pour les anthracyclines, les alcaloïdes de la pervenche et les épipodophyllotoxines. En outre, NCI-H69AR présente une expression altérée des protéines associées à la membrane, y compris l'annexine II, qui peut être associée à des changements dans la signalisation calcique et le trafic vésiculaire - des processus impliqués dans la résistance aux médicaments et la réponse au stress cellulaire. Ces altérations phénotypiques font de NCI-H69AR un modèle précieux pour l'identification des modulateurs de la résistance aux médicaments et pour l'évaluation de l'efficacité des agents ciblant les mécanismes d'efflux ou contournant complètement les voies de résistance.

NCI-H69AR a également été utilisé dans des études comparatives avec sa lignée parentale pour délimiter les changements dans l'expression des gènes et des protéines, les profils de sensibilité aux médicaments et la réponse aux inhibiteurs pharmacologiques. Ce cadre comparatif aide à clarifier l'évolution de la résistance aux médicaments dans le cancer et contribue à la conception de thérapies combinées visant à resensibiliser les tumeurs résistantes. La lignée est généralement cultivée dans un milieu RPMI-1640 supplémenté en sérum bovin fœtal et maintenue dans des conditions atmosphériques standard. Sa robustesse et son phénotype de résistance bien caractérisé lui ont assuré une place dans la recherche préclinique sur la résistance aux médicaments dans le cancer du poumon.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie