NCI-H69AR

A NCI-H69AR é um derivado multirresistente da linha celular parental de carcinoma do pulmão de pequenas células (SCLC) NCI-H69. Foi desenvolvida através da seleção contínua em concentrações crescentes de agentes quimioterapêuticos, como a doxorrubicina. Consequentemente, a linha celular NCI-H69AR serve como um sistema modelo fundamental para a investigação dos mecanismos de resistência adquirida aos fármacos no carcinoma do pulmão pulmonar. Esta linha celular mantém muitas das caraterísticas morfológicas e bioquímicas da sua linha parental, mas apresenta uma resistência profunda a vários agentes citotóxicos, o que a torna especialmente relevante para o estudo das vias de resistência mediadas pelo efluxo.

O principal mecanismo de resistência na linhagem NCI-H69AR envolve a sobreexpressão da proteína de resistência a múltiplos fármacos P-glicoproteína (P-gp), codificada pelo gene MDR1. A P-gp funciona como uma bomba de efluxo dependente de ATP que reduz a acumulação intracelular de fármacos, particularmente no caso das antraciclinas, alcalóides de vinca e epipodofilotoxinas. Além disso, a NCI-H69AR apresenta uma expressão alterada de proteínas associadas à membrana, incluindo a anexina II, que pode estar associada a alterações na sinalização do cálcio e no tráfico vesicular - processos implicados na resistência aos fármacos e na resposta ao stress celular. Estas alterações fenotípicas fazem do NCI-H69AR um modelo valioso para a identificação de moduladores da resistência aos fármacos e para a avaliação da eficácia de agentes que visam os mecanismos de efluxo ou que contornam completamente as vias de resistência.

A linhagem NCI-H69AR também tem sido utilizada em estudos comparativos com a sua linhagem parental para delinear alterações na expressão de genes e proteínas, perfis de sensibilidade a medicamentos e resposta a inibidores farmacológicos. Este quadro comparativo ajuda a clarificar a evolução da resistência aos medicamentos no cancro e contribui para a conceção de terapias combinadas destinadas a re-sensibilizar os tumores resistentes. A linha é normalmente cultivada em meio RPMI-1640 suplementado com soro fetal bovino e mantida em condições atmosféricas normais. A sua robustez e o fenótipo de resistência bem caracterizado garantiram o seu lugar na investigação pré-clínica sobre a resistência aos medicamentos no cancro do pulmão.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia