Skip to content
NCI-H69AR
Tissue
แพร่กระจาย
Disease
มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
NCI-H69 AR, NCI-H69/AR, H69AR, H-69AR

Documents

NCI-H69AR

Cell line · Product number 305840

NCI-H69AR is a multidrug-resistant derivative of the parental small cell lung carcinoma (SCLC) cell line NCI-H69. It was developed through continuous sele...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

NCI-H69AR เป็นอนุพันธ์ที่ดื้อต่อยาหลายชนิดของเซลล์ไลน์มะเร็งปอดชนิดเซลล์เล็ก (SCLC) ต้นกำเนิด NCI-H69มันถูกพัฒนาผ่านการคัดเลือกอย่างต่อเนื่องในความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้นของสารเคมีบำบัด เช่น โดซอร์รูบิซิน ผลที่ได้คือ NCI-H69AR ทำหน้าที่เป็นระบบต้นแบบสำคัญสำหรับการศึกษาวิธีการต้านทานยาที่เกิดใหม่ใน SCLC สายพันธุ์นี้ยังคงรักษาลักษณะทางสัณฐานวิทยาและชีวเคมีหลายประการของสายพันธุ์ต้นกำเนิดไว้ แต่แสดงการต้านทานอย่างรุนแรงต่อสารเคมีหลายชนิด ทำให้มีความเกี่ยวข้องเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาเส้นทางต้านทานที่เกิดจากการขับถ่าย

กลไกหลักของการดื้อยาใน NCI-H69AR เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของโปรตีนต้านยาหลายชนิด P-glycoprotein (P-gp) ที่เกินปกติ ซึ่งถูกควบคุมโดยยีน MDR1 P-gp ทำหน้าที่เป็นปั๊มขับยาออกจากเซลล์ที่อาศัยพลังงานจาก ATP ซึ่งช่วยลดการสะสมของยาภายในเซลล์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งยาในกลุ่มแอนทราไซคลิน, วินคาแอลคาลอยด์ และเอพิโพโดฟิลโทซินนอกจากนี้ NCI-H69AR ยังแสดงการเปลี่ยนแปลงของการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับเยื่อหุ้มเซลล์ รวมถึงแอนเน็กซิน II ซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงในกระบวนการส่งสัญญาณแคลเซียมและการขนส่งถุงเล็กๆ ที่เกี่ยวข้องกับการดื้อยาและการตอบสนองต่อความเครียดของเซลล์ การเปลี่ยนแปลงทางฟีโนไทป์เหล่านี้ทำให้ NCI-H69AR เป็นแบบจำลองที่มีคุณค่าสำหรับการระบุตัวปรับแต่งการดื้อยาและสำหรับการประเมินประสิทธิภาพของสารที่มุ่งเป้าไปที่กลไกการขับออกหรือการหลีกเลี่ยงเส้นทางการดื้อยาโดยสิ้นเชิง

NCI-H69AR ยังถูกใช้ในการศึกษาเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ต้นกำเนิดเพื่อระบุการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของยีนและโปรตีน โปรไฟล์ความไวต่อยา และการตอบสนองต่อสารยับยั้งทางเภสัชวิทยา กรอบการเปรียบเทียบนี้ช่วยชี้แจงวิวัฒนาการของการดื้อยาในมะเร็งและมีส่วนช่วยในการออกแบบการบำบัดแบบผสมผสานที่มุ่งเป้าไปที่การทำให้เนื้องอกที่ดื้อยาไวต่อยาอีกครั้งเซลล์ไลน์นี้มักจะถูกเพาะเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อ RPMI-1640 ที่เสริมด้วยเซรั่มจากเลือดวัวในระยะตั้งท้อง และรักษาภายใต้สภาวะบรรยากาศมาตรฐาน ความแข็งแรงและลักษณะต้านทานต่อยาที่จำเพาะเจาะจงของเซลล์ไลน์นี้ได้รับการยืนยันแล้ว ทำให้มันมีบทบาทสำคัญในงานวิจัยก่อนคลินิกเกี่ยวกับความต้านทานต่อยาในมะเร็งปอด

Tissue
แพร่กระจาย
Disease
มะเร็งเซลล์เล็กของปอด
Metastatic site
น้ำในช่องเยื่อหุ้มปอด
Synonyms
  • NCI-H69 AR
  • NCI-H69/AR
  • H69AR
  • H-69AR

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Cell type
คล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ใช่; ใช่ ในหนูที่ไม่มีขน

04Identifiers

Citation
NCI-H69AR (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305840)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_3513

05Expression and susceptibility

Mutational profile
การกลายพันธุ์: PIK3CA, ง่าย, p.Gly106_Arg108del (c.317_325delGGCAACCGT), Heterozygous (จากเซลล์สายพันธุ์ของพ่อแม่)การกลายพันธุ์, RB1, แบบง่าย, p.Glu748Ter (c.2242G>T), ชนิดโฮโมไซโกต (จากเซลล์ไลน์ของพ่อแม่) การกลายพันธุ์, TP53, แบบง่าย, p.Glu171Ter (c.511G>T), ชนิดโฮโมไซโกต (จากเซลล์ไลน์ของพ่อแม่)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 20%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
55 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน