NCI-H69AR

NCI-H69ARは、親株である小細胞肺癌（SCLC）細胞株NCI-H69の多剤耐性誘導体である。NCI-H69ARは、ドキソルビシンのような化学療法剤の濃度を増加させながら連続的に選択することにより開発された。その結果、NCI-H69ARはSCLCにおける後天性薬剤耐性のメカニズムを研究するための重要なモデル系となっている。この細胞株は、その親株の形態学的および生化学的特徴の多くを保持しているが、いくつかの細胞毒性薬剤に対して深い耐性を示すため、排出を介する耐性経路の研究に特に適している。

NCI-H69ARにおける耐性の主なメカニズムは、MDR1遺伝子によってコードされる多剤耐性タンパク質P-糖タンパク質（P-gp）の過剰発現である。P-gpはATP依存性の排出ポンプとして機能し、特にアントラサイクリン、ビンカアルカロイド、エピポドフィロトキシンに対する細胞内薬物蓄積を減少させる。さらに、NCI-H69ARはアネキシンIIを含む膜関連タンパク質の発現変化を示し、これは薬剤耐性や細胞ストレス応答に関与するカルシウムシグナル伝達や小胞輸送の変化に関連している可能性がある。これらの表現型の変化により、NCI-H69ARは薬剤耐性のモジュレーターを同定し、薬剤排出機構を標的とする薬剤や耐性経路を完全に迂回する薬剤の有効性を評価するための貴重なモデルとなる。

NCI-H69ARはまた、遺伝子やタンパク質の発現、薬剤感受性プロファイル、薬理学的阻害剤に対する反応性の変化を明らかにするために、親株との比較研究にも用いられている。この比較の枠組みは、がんにおける薬剤耐性の進化を明らかにし、耐性腫瘍の再感作を目的とした併用療法のデザインに貢献する。この株は通常、ウシ胎児血清を添加したRPMI-1640培地で培養され、標準的な大気条件下で維持される。その頑健性と耐性表現型の特徴から、肺癌の薬剤耐性に関する前臨床研究においてその地位を確実なものとしている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。