NCI-H69AR

NCI-H69AR er et multiresistent derivat av den opprinnelige cellelinjen NCI-H69 for småcellet lungekarsinom (SCLC). Den ble utviklet gjennom kontinuerlig seleksjon i økende konsentrasjoner av kjemoterapeutiske midler som doksorubicin. NCI-H69AR er derfor et viktig modellsystem for å undersøke mekanismer for ervervet legemiddelresistens i SCLC. Denne cellelinjen beholder mange av de morfologiske og biokjemiske egenskapene til foreldrelinjen, men utviser dyp resistens mot flere cytotoksiske midler, noe som gjør den spesielt relevant for studier av effluksmedierte resistensveier.

Den primære resistensmekanismen i NCI-H69AR involverer overekspresjon av multiresistensproteinet P-glykoprotein (P-gp), som kodes av MDR1-genet. P-gp fungerer som en ATP-avhengig utstrømningspumpe som reduserer intracellulær akkumulering av legemidler, særlig for antracykliner, vinca-alkaloider og epipodofyllotoksiner. I tillegg viser NCI-H69AR endret uttrykk av membranassosierte proteiner, inkludert annexin II, noe som kan være forbundet med endringer i kalsiumsignalering og vesikulær transport - prosesser som er involvert i legemiddelresistens og cellulær stressrespons. Disse fenotypiske endringene gjør NCI-H69AR til en verdifull modell for å identifisere modulatorer av legemiddelresistens og for å evaluere effekten av midler som retter seg mot utstrømmingsmekanismer eller omgår resistensveier helt og holdent.

NCI-H69AR har også blitt brukt i komparative studier med foreldrelinjen for å kartlegge endringer i gen- og proteinuttrykk, legemiddelfølsomhetsprofiler og respons på farmakologiske hemmere. Dette komparative rammeverket bidrar til å klargjøre utviklingen av legemiddelresistens i kreft og bidrar til utformingen av kombinasjonsbehandlinger som tar sikte på å resensitivisere resistente svulster. Linjen dyrkes vanligvis i RPMI-1640-medium supplert med føtalt bovint serum og holdes under standard atmosfæriske forhold. Dens robusthet og velkarakteriserte resistensfenotype har sikret den en plass i preklinisk forskning på legemiddelresistens i lungekreft.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring