NCI-H69AR

NCI-H69AR è un derivato multifarmaco resistente della linea cellulare parentale di carcinoma polmonare a piccole cellule (SCLC) NCI-H69. È stata sviluppata attraverso una selezione continua in concentrazioni crescenti di agenti chemioterapici come la doxorubicina. Di conseguenza, NCI-H69AR è un sistema modello fondamentale per studiare i meccanismi di resistenza acquisita ai farmaci nel SCLC. Questa linea cellulare conserva molte delle caratteristiche morfologiche e biochimiche della linea parentale, ma presenta una profonda resistenza a diversi agenti citotossici, il che la rende particolarmente importante per lo studio delle vie di resistenza mediate dall'efflusso.

Il meccanismo primario di resistenza in NCI-H69AR comporta la sovraespressione della proteina di resistenza multifarmaco P-glicoproteina (P-gp), codificata dal gene MDR1. La P-gp funziona come una pompa di efflusso ATP-dipendente che riduce l'accumulo intracellulare di farmaci, in particolare per le antracicline, gli alcaloidi della vinca e le epipodofillotossine. Inoltre, NCI-H69AR presenta un'espressione alterata di proteine associate alla membrana, tra cui l'annexina II, che potrebbe essere associata a cambiamenti nella segnalazione del calcio e nel traffico vescicolare, processi implicati nella resistenza ai farmaci e nella risposta allo stress cellulare. Queste alterazioni fenotipiche rendono NCI-H69AR un modello prezioso per l'identificazione di modulatori della resistenza ai farmaci e per la valutazione dell'efficacia di agenti che mirano ai meccanismi di efflusso o che aggirano completamente le vie di resistenza.

NCI-H69AR è stato anche utilizzato in studi comparativi con la sua linea parentale per delineare i cambiamenti nell'espressione genica e proteica, i profili di sensibilità ai farmaci e la risposta agli inibitori farmacologici. Questo quadro comparativo aiuta a chiarire l'evoluzione della resistenza ai farmaci nel cancro e contribuisce alla progettazione di terapie combinate volte a risensibilizzare i tumori resistenti. La linea è tipicamente coltivata in terreno RPMI-1640 integrato con siero fetale bovino e mantenuta in condizioni atmosferiche standard. La sua robustezza e il fenotipo di resistenza ben caratterizzato ne hanno assicurato il posto nella ricerca preclinica sulla resistenza ai farmaci nel cancro del polmone.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia