NCI-H69AR

NCI-H69AR on monilääkkeille vastustuskykyinen johdannainen pienisoluisesta keuhkosyövästä (SCLC) NCI-H69. Se kehitettiin jatkuvalla valikoinnilla kasvavilla kemoterapeuttisten aineiden, kuten doksorubisiinin, pitoisuuksilla. Tämän vuoksi NCI-H69AR toimii keskeisenä mallijärjestelmänä SCLC:n hankitun lääkeresistenssin mekanismien tutkimisessa. Tämä solulinja säilyttää monet vanhempiensa morfologiset ja biokemialliset piirteet, mutta sillä on syvä resistenssi useille sytotoksisille aineille, mikä tekee siitä erityisen tärkeän efflux-välitteisten resistenssireittien tutkimisessa.

NCI-H69AR:n ensisijainen resistenssimekanismi liittyy MDR1-geenin koodaaman monilääkeresistenssiproteiini P-glykoproteiinin (P-gp) yliekspressioon. P-gp toimii ATP-riippuvaisena effluksipumpuna, joka vähentää lääkkeiden kertymistä solunsisäisesti, erityisesti antrasykliinien, vinka-alkaloidien ja epipodofyllotoksiinien osalta. Lisäksi NCI-H69AR:lla on muuttunut kalvoihin liittyvien proteiinien, kuten annexiini II:n, ilmentyminen, mikä voi liittyä muutoksiin kalsiumsignaalien ja vesikkelien kulkeutumisessa - prosesseissa, jotka ovat mukana lääkeresistenssissä ja solun stressivasteessa. Nämä fenotyyppiset muutokset tekevät NCI-H69AR:sta arvokkaan mallin lääkeresistenssin modulaattoreiden tunnistamiseksi ja sellaisten aineiden tehokkuuden arvioimiseksi, jotka kohdistuvat efflux-mekanismeihin tai ohittavat resistenssiväylät kokonaan.

NCI-H69AR-mallia on myös käytetty vertailututkimuksissa emolinjaan nähden geenien ja proteiinien ilmentymisen muutosten, lääkeherkkyysprofiilien ja farmakologisille inhibiittoreille annettavan vasteen määrittämiseksi. Tämä vertaileva kehys auttaa selvittämään lääkeresistenssin kehittymistä syövässä ja auttaa suunnittelemaan yhdistelmähoitoja, joilla pyritään herkistämään resistentit kasvaimet uudelleen. Linjaa viljellään tyypillisesti RPMI-1640-mediassa, jota on täydennetty naudan sikiöseerumilla, ja sitä ylläpidetään tavanomaisissa ilmasto-olosuhteissa. Sen kestävyys ja hyvin karakterisoitu resistenssifenotyyppi ovat varmistaneet sen aseman keuhkosyövän lääkeresistenssiä koskevassa prekliinisessä tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa