NCI-H69AR

NCI-H69AR هو مشتق مقاوم للأدوية المتعددة من خط خلايا سرطان الرئة صغير الخلايا (SCLC) الأبوي NCI-H69. تم تطويره من خلال الانتقاء المستمر في تركيزات متزايدة من عوامل العلاج الكيميائي مثل دوكسوروبيسين. ونتيجة لذلك، يُستخدم NCI-H69AR كنظام نموذجي رئيسي لدراسة آليات مقاومة الأدوية المكتسبة في سرطان الرئة السرطاني الخلوي السرطاني القطني. يحتفظ هذا الخط الخلوي بالعديد من السمات المورفولوجية والكيميائية الحيوية لخطه الأبوي ولكنه يُظهر مقاومة عميقة للعديد من العوامل السامة للخلايا، مما يجعله مناسبًا بشكل خاص لدراسة مسارات المقاومة بوساطة التدفق.

تنطوي الآلية الأساسية للمقاومة في NCI-H69AR على الإفراط في التعبير عن بروتين P-glycoprotein P-glycoprotein (P-gp) المقاوم للأدوية المتعددة والذي يتم ترميزه بواسطة جين MDR1. يعمل بروتين P-gp كمضخة انسياب تعتمد على بروتين ATP الذي يقلل من تراكم الأدوية داخل الخلايا، خاصةً للأنثراسيكلينات، وقلويدات الفينكا، والسموم الإبيودوفيلوتوكسينية. بالإضافة إلى ذلك، يُظهر NCI-H69AR تعبيرًا متغيرًا عن البروتينات المرتبطة بالأغشية، بما في ذلك البروتين أنكسان 2، والذي قد يرتبط بالتغيرات في إشارات الكالسيوم وعمليات النقل الحويصلي - وهي عمليات متورطة في مقاومة الأدوية والاستجابة للإجهاد الخلوي. تجعل هذه التغييرات في النمط الظاهري من NCI-H69AR نموذجًا قيّمًا لتحديد مُعدِّلات مقاومة الأدوية وتقييم فعالية العوامل التي تستهدف آليات التدفق أو تجاوز مسارات المقاومة تمامًا.

كما استُخدم NCI-H69AR في الدراسات المقارنة مع الخط الأبوي لتحديد التغيرات في التعبير الجيني والبروتيني، وملامح الحساسية للأدوية، والاستجابة للمثبطات الدوائية. ويساعد هذا الإطار المقارن على توضيح تطور مقاومة الأدوية في السرطان ويساهم في تصميم علاجات مركبة تهدف إلى إعادة تحسس الأورام المقاومة. يُزرع هذا الخط عادةً في وسط RPMI-1640 المضاف إليه مصل البقر الجنيني ويُحفظ في ظروف جوية قياسية. وقد ضمنت متانته ونمطه الظاهري المقاوم المميز بشكل جيد مكانته في الأبحاث ما قبل السريرية حول مقاومة الأدوية في سرطان الرئة.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان