NCI-H69AR

NCI-H69AR er et multiresistent derivat af den oprindelige cellelinje for småcellet lungekarcinom (SCLC), NCI-H69. Den blev udviklet gennem kontinuerlig selektion i stigende koncentrationer af kemoterapeutiske midler som doxorubicin. Derfor fungerer NCI-H69AR som et vigtigt modelsystem til undersøgelse af mekanismer for erhvervet lægemiddelresistens i SCLC. Denne cellelinje bevarer mange af de morfologiske og biokemiske træk ved sin forældrelinje, men udviser dybtgående resistens over for flere cytotoksiske midler, hvilket gør den særlig relevant til undersøgelse af efflux-medierede resistensveje.

Den primære resistensmekanisme i NCI-H69AR involverer overekspression af multidrug-resistensproteinet P-glycoprotein (P-gp), som kodes af MDR1-genet. P-gp fungerer som en ATP-afhængig efflux-pumpe, der reducerer intracellulær lægemiddelakkumulering, især for antracykliner, vinca-alkaloider og epipodophyllotoxiner. Derudover udviser NCI-H69AR ændret udtryk af membranassocierede proteiner, herunder annexin II, som kan være forbundet med ændringer i calciumsignalering og vesikulær handel - processer, der er involveret i lægemiddelresistens og cellulær stressrespons. Disse fænotypiske ændringer gør NCI-H69AR til en værdifuld model til at identificere modulatorer af lægemiddelresistens og til at evaluere effekten af midler, der retter sig mod efflux-mekanismer eller helt omgår resistensveje.

NCI-H69AR er også blevet brugt i sammenlignende studier med sin forældrelinje til at afgrænse ændringer i gen- og proteinudtryk, lægemiddelfølsomhedsprofiler og respons på farmakologiske inhibitorer. Denne sammenlignende ramme hjælper med at afklare udviklingen af lægemiddelresistens i kræft og bidrager til udformningen af kombinationsbehandlinger, der har til formål at genskabe resistente tumorer. Linjen dyrkes typisk i RPMI-1640-medium suppleret med føtalt bovint serum og vedligeholdes under standard atmosfæriske forhold. Dens robusthed og velkarakteriserede resistensfænotype har sikret den en plads i den prækliniske forskning i lægemiddelresistens i lungekræft.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring