NCI-H69AR

NCI-H69AR jest wielolekooporną pochodną macierzystej linii komórkowej drobnokomórkowego raka płuca (SCLC) NCI-H69. Została ona opracowana poprzez ciągłą selekcję w rosnących stężeniach środków chemioterapeutycznych, takich jak doksorubicyna. W rezultacie NCI-H69AR służy jako kluczowy system modelowy do badania mechanizmów nabytej oporności na leki w SCLC. Ta linia komórkowa zachowuje wiele cech morfologicznych i biochemicznych swojej linii rodzicielskiej, ale wykazuje głęboką oporność na kilka leków cytotoksycznych, co czyni ją szczególnie istotną do badania szlaków oporności za pośrednictwem wypływu.

Podstawowy mechanizm oporności w NCI-H69AR obejmuje nadekspresję białka oporności wielolekowej P-glikoproteiny (P-gp), kodowanego przez gen MDR1. P-gp działa jako zależna od ATP pompa wypływowa, która zmniejsza wewnątrzkomórkową akumulację leków, szczególnie w przypadku antracyklin, alkaloidów vinca i epipodofilotoksyn. Dodatkowo, NCI-H69AR wykazuje zmienioną ekspresję białek związanych z błoną, w tym aneksyny II, co może być związane ze zmianami w sygnalizacji wapniowej i transporcie pęcherzykowym - procesach związanych z opornością na leki i odpowiedzią na stres komórkowy. Te zmiany fenotypowe sprawiają, że NCI-H69AR jest cennym modelem do identyfikacji modulatorów oporności na leki oraz do oceny skuteczności środków ukierunkowanych na mechanizmy wypływu lub całkowicie omijających szlaki oporności.

NCI-H69AR został również wykorzystany w badaniach porównawczych z linią rodzicielską w celu określenia zmian w ekspresji genów i białek, profili wrażliwości na leki i odpowiedzi na inhibitory farmakologiczne. Te ramy porównawcze pomagają wyjaśnić ewolucję oporności na leki w raku i przyczyniają się do projektowania terapii skojarzonych mających na celu ponowne uwrażliwienie opornych nowotworów. Linia ta jest zwykle hodowana w pożywce RPMI-1640 uzupełnionej płodową surowicą bydlęcą i utrzymywana w standardowych warunkach atmosferycznych. Jej odporność i dobrze scharakteryzowany fenotyp oporności zapewniły jej miejsce w badaniach przedklinicznych nad opornością na leki w raku płuc.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym