NCI-H69AR

La lignée NCI-H69AR est un dérivé multirésistant de la lignée cellulaire parentale NCI-H69, issue d’un carcinome pulmonaire à petites cellules (CPPC). Elle a été développée par sélection continue dans des concentrations croissantes d’agents chimiothérapeutiques tels que la doxorubicine. Par conséquent, la lignée NCI-H69AR constitue un système modèle clé pour l’étude des mécanismes de résistance acquise aux médicaments dans le SCLC. Cette lignée cellulaire conserve bon nombre des caractéristiques morphologiques et biochimiques de sa lignée parente, mais présente une résistance marquée à plusieurs agents cytotoxiques, ce qui la rend particulièrement pertinente pour l’étude des voies de résistance médiées par l’efflux.

Le principal mécanisme de résistance de la lignée NCI-H69AR implique la surexpression de la protéine de résistance aux médicaments multiples, la P-glycoprotéine (P-gp), codée par le gène MDR1. La P-gp agit comme une pompe d’efflux dépendante de l’ATP qui réduit l’accumulation intracellulaire des médicaments, en particulier des anthracyclines, des alcaloïdes de la pervenche et des épipodophyllotoxines. De plus, la lignée NCI-H69AR présente une expression altérée de protéines associées à la membrane, notamment l’annexine II, ce qui pourrait être lié à des modifications de la signalisation calcique et du trafic vésiculaire — des processus impliqués dans la résistance aux médicaments et la réponse au stress cellulaire. Ces altérations phénotypiques font de la lignée NCI-H69AR un modèle précieux pour l’identification de modulateurs de la résistance aux médicaments et pour l’évaluation de l’efficacité d’agents ciblant les mécanismes d’efflux ou contournant complètement les voies de résistance.

La lignée NCI-H69AR a également été utilisée dans des études comparatives avec sa lignée parentale afin de mettre en évidence les changements dans l’expression génique et protéique, les profils de sensibilité aux médicaments et la réponse aux inhibiteurs pharmacologiques. Ce cadre comparatif aide à clarifier l’évolution de la résistance aux médicaments dans le cancer et contribue à la conception de thérapies combinées visant à resensibiliser les tumeurs résistantes. Cette lignée est généralement cultivée dans un milieu RPMI-1640 enrichi de sérum fœtal bovin et maintenue dans des conditions atmosphériques standard. Sa robustesse et son phénotype de résistance bien caractérisé lui ont assuré une place de choix dans la recherche préclinique sur la résistance aux médicaments dans le cancer du poumon.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.