NCI-H69AR

NCI-H69AR je na več zdravil odporen derivat starševske celične linije NCI-H69 za malocelularni pljučni karcinom (SCLC). Razvili so jo z neprekinjeno selekcijo v naraščajočih koncentracijah kemoterapevtikov, kot je doksorubicin. Zato je NCI-H69AR ključni modelni sistem za raziskovanje mehanizmov pridobljene odpornosti na zdravila pri SCLC. Ta celična linija ohranja številne morfološke in biokemične značilnosti svoje starševske linije, vendar izkazuje globoko odpornost na več citotoksičnih zdravil, zaradi česar je še posebej pomembna za preučevanje poti odpornosti, ki jih posreduje iztok.

Glavni mehanizem odpornosti pri NCI-H69AR vključuje prekomerno izražanje beljakovine P-glikoproteina (P-gp), ki jo kodira gen MDR1. P-gp deluje kot od ATP odvisna črpalka za iztok, ki zmanjšuje znotrajcelično kopičenje zdravil, zlasti antraciklinov, alkaloidov vinke in epipodofilotoksinov. Poleg tega je pri NCI-H69AR spremenjeno izražanje z membrano povezanih beljakovin, vključno z aneksinom II, kar je lahko povezano s spremembami kalcijeve signalizacije in vezikularnega prometa - procesi, ki so vpleteni v odpornost na zdravila in odziv celic na stres. Zaradi teh fenotipskih sprememb je NCI-H69AR dragocen model za identifikacijo modulatorjev odpornosti na zdravila in za ocenjevanje učinkovitosti zdravil, ki so usmerjena v mehanizme iztoka ali v celoti zaobidejo poti odpornosti.

NCI-H69AR je bil uporabljen tudi v primerjalnih študijah s starševsko linijo za opredelitev sprememb v izražanju genov in beljakovin, profilov občutljivosti na zdravila in odziva na farmakološke zaviralce. Ta primerjalni okvir pomaga pojasniti razvoj odpornosti na zdravila pri raku in prispeva k oblikovanju kombiniranih terapij, namenjenih ponovni senzibilizaciji odpornih tumorjev. Linija se običajno goji v gojišču RPMI-1640, dopolnjenem s fetalnim govejim serumom, in vzdržuje v standardnih atmosferskih pogojih. Njena robustnost in dobro opisan fenotip odpornosti sta ji zagotovila mesto v predkliničnih raziskavah odpornosti na zdravila pri pljučnem raku.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo