NCI-H69AR

NCI-H69AR es un derivado multirresistente de la línea celular parental de carcinoma pulmonar de células pequeñas (CPCP) NCI-H69. Se desarrolló mediante selección continua en concentraciones crecientes de agentes quimioterapéuticos como la doxorrubicina. Como resultado, NCI-H69AR sirve como sistema modelo clave para investigar los mecanismos de resistencia adquirida a fármacos en el CPCP. Esta línea celular conserva muchas de las características morfológicas y bioquímicas de su línea parental, pero muestra una profunda resistencia a varios agentes citotóxicos, lo que la hace especialmente relevante para el estudio de las vías de resistencia mediadas por eflujo.

El principal mecanismo de resistencia en el NCI-H69AR implica la sobreexpresión de la proteína de resistencia a múltiples fármacos P-glicoproteína (P-gp), codificada por el gen MDR1. La P-gp funciona como una bomba de eflujo dependiente de ATP que reduce la acumulación intracelular de fármacos, en particular para las antraciclinas, los alcaloides de la vinca y las epipodofilotoxinas. Además, NCI-H69AR muestra una expresión alterada de proteínas asociadas a la membrana, incluida la anexina II, que puede estar asociada a cambios en la señalización del calcio y el tráfico vesicular, procesos implicados en la resistencia a fármacos y la respuesta al estrés celular. Estas alteraciones fenotípicas hacen del NCI-H69AR un modelo valioso para identificar moduladores de la resistencia a fármacos y para evaluar la eficacia de agentes dirigidos a mecanismos de eflujo o que eluden por completo las vías de resistencia.

NCI-H69AR también se ha utilizado en estudios comparativos con su línea parental para delinear cambios en la expresión de genes y proteínas, perfiles de sensibilidad a fármacos y respuesta a inhibidores farmacológicos. Este marco comparativo ayuda a aclarar la evolución de la farmacorresistencia en el cáncer y contribuye al diseño de terapias combinadas dirigidas a resensibilizar tumores resistentes. La línea se cultiva normalmente en medio RPMI-1640 suplementado con suero bovino fetal y se mantiene en condiciones atmosféricas estándar. Su robustez y su fenotipo de resistencia bien caracterizado han asegurado su lugar en la investigación preclínica sobre la resistencia a fármacos en el cáncer de pulmón.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía