NCI-H69AR

NCI-H69AR הוא נגזרת עמידה לתרופות מרובות של קו התאים NCI-H69 של קרצינומה של תאי ריאה קטנים (SCLC). הוא פותח באמצעות ברירה מתמשכת בריכוזים הולכים וגדלים של חומרים כימותרפיים כגון דוקסורוביצין. כתוצאה מכך, NCI-H69AR משמש כמערכת מודל מרכזית לחקר מנגנוני העמידות הנרכשת לתרופות ב-SCLC. קו תאים זה שומר על רבים מהמאפיינים המורפולוגיים והביוכימיים של הקו ההורי, אך מפגין עמידות עמוקה למספר חומרים ציטוטוקסיים, מה שהופך אותו לרלוונטי במיוחד לחקר מסלולי העמידות המתווכים על ידי הפרשה.

המנגנון העיקרי של העמידות ב-NCI-H69AR כרוך בביטוי-יתר של החלבון P-glycoprotein (P-gp) העמיד למספר תרופות, המקודד על ידי הגן MDR1. P-gp פועל כמשאבת הפרשה התלויה ב-ATP, המפחיתה את הצטברות התרופות בתאים, במיוחד עבור אנתרציקלינים, אלקלואידים של וינקה ואפיפודופילוטוקסינים. בנוסף, NCI-H69AR מפגין ביטוי שונה של חלבונים הקשורים לממברנה, כולל אנקסין II, אשר עשוי להיות קשור לשינויים באיתות סידן ובתהליכי הובלה של שלפוחיות המעורבים בעמידות לתרופות ובתגובת לחץ תאי. שינויים פנוטיפיים אלה הופכים את NCI-H69AR למודל חשוב לזיהוי מווסתים של עמידות לתרופות ולהערכת היעילות של חומרים המכוונים למנגנוני הפרשה או עוקפים לחלוטין מסלולי עמידות.

NCI-H69AR שימש גם במחקרים השוואתיים עם הקו ההורי שלו כדי לתאר שינויים בביטוי גנים וחלבונים, פרופילי רגישות לתרופות ותגובה למעכבים פרמקולוגיים. מסגרת השוואתית זו מסייעת להבהיר את התפתחות העמידות לתרופות בסרטן ותורמת לתכנון טיפולים משולבים שמטרתם להחזיר את הרגישות של גידולים עמידים. הקו מתורבת בדרך כלל במדיום RPMI-1640 בתוספת סרום עגלי, ומוחזק בתנאי אטמוספירה סטנדרטיים. חוסנו ופנוטיפ העמידות המאופיין היטב הבטיחו את מקומו במחקר פרה-קליני על עמידות לתרופות בסרטן ריאות.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו