NCI-H69AR

Το NCI-H69AR είναι ένα πολυανθεκτικό παράγωγο της γονικής κυτταρικής σειράς μικροκυτταρικού καρκινώματος του πνεύμονα (SCLC) NCI-H69. Αναπτύχθηκε μέσω συνεχούς επιλογής σε αυξανόμενες συγκεντρώσεις χημειοθεραπευτικών παραγόντων όπως η δοξορουβικίνη. Ως αποτέλεσμα, η NCI-H69AR χρησιμεύει ως βασικό πρότυπο σύστημα για τη διερεύνηση των μηχανισμών επίκτητης φαρμακευτικής αντοχής στο SCLC. Αυτή η κυτταρική σειρά διατηρεί πολλά από τα μορφολογικά και βιοχημικά χαρακτηριστικά της γονικής της σειράς, αλλά παρουσιάζει βαθιά αντίσταση σε διάφορους κυτταροτοξικούς παράγοντες, γεγονός που την καθιστά ιδιαίτερα σημαντική για τη μελέτη των μονοπατιών αντίστασης που διαμεσολαβούνται από την εκροή.

Ο πρωταρχικός μηχανισμός αντίστασης στην NCI-H69AR περιλαμβάνει την υπερέκφραση της πρωτεΐνης πολυφαρμακευτικής αντοχής P-γλυκοπρωτεΐνη (P-gp), η οποία κωδικοποιείται από το γονίδιο MDR1. Η P-gp λειτουργεί ως αντλία εκροής εξαρτώμενη από την ΑΤΡ που μειώνει την ενδοκυττάρια συσσώρευση φαρμάκων, ιδίως για τις ανθρακυκλίνες, τα αλκαλοειδή βίνκα και τις επιποδοφυλλοτοξίνες. Επιπλέον, η NCI-H69AR παρουσιάζει τροποποιημένη έκφραση πρωτεϊνών που συνδέονται με τη μεμβράνη, συμπεριλαμβανομένης της annexin II, η οποία μπορεί να σχετίζεται με αλλαγές στη σηματοδότηση ασβεστίου και την κυψελιδική διακίνηση - διαδικασίες που εμπλέκονται στην αντίσταση στα φάρμακα και στην κυτταρική απόκριση στο στρες. Αυτές οι φαινοτυπικές μεταβολές καθιστούν το NCI-H69AR ένα πολύτιμο μοντέλο για τον εντοπισμό ρυθμιστών της αντίστασης στα φάρμακα και για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας παραγόντων που στοχεύουν σε μηχανισμούς εκροής ή παρακάμπτουν συνολικά τις οδούς αντίστασης.

Το NCI-H69AR έχει επίσης χρησιμοποιηθεί σε συγκριτικές μελέτες με τη γονική του σειρά για τη σκιαγράφηση αλλαγών στην έκφραση γονιδίων και πρωτεϊνών, προφίλ ευαισθησίας στα φάρμακα και απόκριση σε φαρμακολογικούς αναστολείς. Αυτό το συγκριτικό πλαίσιο συμβάλλει στην αποσαφήνιση της εξέλιξης της ανθεκτικότητας στα φάρμακα στον καρκίνο και συμβάλλει στο σχεδιασμό συνδυαστικών θεραπειών με στόχο την επαναευαισθητοποίηση ανθεκτικών όγκων. Η σειρά καλλιεργείται συνήθως σε μέσο RPMI-1640 συμπληρωμένο με εμβρυϊκό ορό βοοειδών και διατηρείται υπό τυπικές ατμοσφαιρικές συνθήκες. Η ευρωστία της και ο καλά χαρακτηρισμένος φαινότυπος ανθεκτικότητας έχουν εξασφαλίσει τη θέση της στην προκλινική έρευνα για την ανθεκτικότητα στα φάρμακα στον καρκίνο του πνεύμονα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης