NCI-H69AR

NCI-H69AR is een multiresistente afgeleide van de oudercellijn NCI-H69 van het kleincellig longcarcinoom (SCLC). Ze werd ontwikkeld door continue selectie in toenemende concentraties chemotherapeutische middelen zoals doxorubicine. Als gevolg hiervan dient NCI-H69AR als een belangrijk modelsysteem voor het onderzoeken van mechanismen van verworven geneesmiddelenresistentie in SCLC. Deze cellijn heeft veel van de morfologische en biochemische kenmerken van de ouderlijn, maar vertoont een hoge resistentie tegen verschillende cytotoxische middelen, waardoor deze bijzonder relevant is voor het bestuderen van efflux-gemedieerde resistentiewegen.

Het primaire mechanisme van resistentie in NCI-H69AR is overexpressie van het multidrug resistentie eiwit P-glycoproteïne (P-gp), dat gecodeerd wordt door het MDR1 gen. P-gp functioneert als een ATP-afhankelijke effluxpomp die de intracellulaire accumulatie van geneesmiddelen vermindert, met name voor anthracyclines, vinca-alkaloïden en epipodofyllotoxines. Daarnaast vertoont NCI-H69AR een veranderde expressie van membraangebonden eiwitten, waaronder annexine II, wat geassocieerd kan worden met veranderingen in calciumsignalering en vesiculaire transportprocessen die betrokken zijn bij geneesmiddelenresistentie en cellulaire stressrespons. Deze fenotypische veranderingen maken NCI-H69AR tot een waardevol model voor het identificeren van modulatoren van geneesmiddelenresistentie en voor het evalueren van de werkzaamheid van middelen die zich richten op effluxmechanismen of die de resistentiewegen helemaal omzeilen.

NCI-H69AR is ook gebruikt in vergelijkende studies met de ouderlijn om veranderingen in gen- en eiwitexpressie, geneesmiddelgevoeligheidsprofielen en respons op farmacologische remmers te bepalen. Dit vergelijkende kader helpt de evolutie van geneesmiddelenresistentie in kanker te verduidelijken en draagt bij aan het ontwerp van combinatietherapieën gericht op het opnieuw gevoelig maken van resistente tumoren. De lijn wordt gewoonlijk gekweekt in RPMI-1640 medium aangevuld met foetaal runderserum en onderhouden onder standaard atmosferische omstandigheden. De robuustheid en het goed gekarakteriseerde resistentiefenotype hebben ervoor gezorgd dat de lijn een belangrijke rol speelt in preklinisch onderzoek naar resistentie tegen geneesmiddelen in longkanker.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring