NCI-H69AR

NCI-H69AR är en multiresistent variant av den ursprungliga cellinjen NCI-H69 för småcelligt lungkarcinom (SCLC). Den utvecklades genom kontinuerlig selektion i ökande koncentrationer av kemoterapeutiska medel som doxorubicin. NCI-H69AR fungerar därför som ett viktigt modellsystem för att undersöka mekanismerna bakom förvärvad läkemedelsresistens i SCLC. Denna cellinje behåller många av de morfologiska och biokemiska egenskaperna hos sin föräldralinje men uppvisar djupgående resistens mot flera cytotoxiska medel, vilket gör den särskilt relevant för att studera effluxmedierade resistensvägar.

Den primära resistensmekanismen i NCI-H69AR innefattar överuttryck av det multidrogresistensprotein P-glykoprotein (P-gp) som kodas av MDR1-genen. P-gp fungerar som en ATP-beroende effluxpump som minskar intracellulär läkemedelsackumulering, särskilt för antracykliner, vincaalkaloider och epipodofyllotoxiner. Dessutom uppvisar NCI-H69AR ett förändrat uttryck av membranassocierade proteiner, inklusive annexin II, vilket kan vara förknippat med förändringar i kalciumsignalering och vesikulär trafiktransport - processer som är inblandade i läkemedelsresistens och cellulära stressreaktioner. Dessa fenotypiska förändringar gör NCI-H69AR till en värdefull modell för att identifiera modulatorer av läkemedelsresistens och för att utvärdera effekten av medel som är inriktade på effluxmekanismer eller som helt och hållet kringgår resistensvägarna.

NCI-H69AR har också använts i jämförande studier med sin föräldralinje för att beskriva förändringar i gen- och proteinuttryck, läkemedelskänslighetsprofiler och respons på farmakologiska hämmare. Detta jämförande ramverk hjälper till att klargöra utvecklingen av läkemedelsresistens i cancer och bidrar till utformningen av kombinationsbehandlingar som syftar till att åter göra resistenta tumörer känsliga. Linjen odlas vanligen i RPMI-1640-medium kompletterat med fetalt bovint serum och hålls under standardiserade atmosfäriska förhållanden. Dess robusthet och välkarakteriserade resistensfenotyp har säkrat dess plats i preklinisk forskning om läkemedelsresistens i lungcancer.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring