NCI-H69AR

NCI-H69AR on mitmele ravimile resistentne tuletis NCI-H69 väikeserakkulisest kopsukartsinoomi (SCLC) rakuliinist. See on välja arendatud pideva selektsiooni teel suurenevate kontsentratsioonidega kemoterapeutiliste ainete, nagu doksorubitsiin, kasutamisel. Selle tulemusena on NCI-H69AR peamine mudelisüsteem SCLC omandatud ravimresistentsuse mehhanismide uurimiseks. See rakuliin säilitab paljud oma vanemliini morfoloogilised ja biokeemilised omadused, kuid näitab sügavat resistentsust mitmete tsütotoksiliste ainete suhtes, mistõttu on see eriti oluline efflux-vahendatud resistentsusradade uurimiseks.

NCI-H69AR resistentsuse peamine mehhanism hõlmab MDR1-geeni poolt kodeeritava multiresistentsuse valgu P-glükoproteiini (P-gp) üleekspressiooni. P-gp toimib ATP-sõltuva väljavoolupumbana, mis vähendab ravimite rakusisest akumulatsiooni, eriti antratsükliinide, vinca alkaloidide ja epipodofülotoksiinide puhul. Lisaks sellele on NCI-H69AR-l muutunud membraaniga seotud valkude, sealhulgas annexiin II, ekspressioon, mis võib olla seotud kaltsiumisignaali ja vesikulaarliikumise muutustega - protsessidega, mis on seotud ravimiresistentsuse ja raku stressireaktsiooniga. Need fenotüüpsed muutused teevad NCI-H69AR-st väärtusliku mudeli ravimresistentsuse modulaatorite tuvastamiseks ja selliste ainete tõhususe hindamiseks, mis on suunatud väljavoolumehhanismidele või resistentsusradade ümbersõitmisele.

NCI-H69AR-i on kasutatud ka võrdlusuuringutes oma vanemliiniga, et piiritleda geenide ja valkude ekspressiooni muutusi, ravimitundlikkuse profiile ja reaktsiooni farmakoloogilistele inhibiitoritele. See võrdlev raamistik aitab selgitada ravimresistentsuse arengut vähktõve puhul ja aitab kaasa resistentsete kasvajate uuesti tundlikuks muutmisele suunatud kombinatsiooniteraapiate kavandamisele. Liini kasvatatakse tavaliselt RPMI-1640 söötmes, mida on täiendatud veiste loote seerumiga, ja seda hoitakse standardsetes atmosfääritingimustes. Selle vastupidavus ja hästi iseloomustatud resistentsuse fenotüüp on kindlustanud selle koha kopsuvähi ravimresistentsuse prekliinilistes uuringutes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest