NCI-H69AR

NCI-H69AR je multirezistentní derivát rodičovské buněčné linie malobuněčného karcinomu plic (SCLC) NCI-H69. Byla vyvinuta kontinuální selekcí při zvyšujících se koncentracích chemoterapeutických látek, jako je doxorubicin. NCI-H69AR tak slouží jako klíčový modelový systém pro zkoumání mechanismů získané lékové rezistence u SCLC. Tato buněčná linie si zachovává mnoho morfologických a biochemických vlastností své rodičovské linie, ale vykazuje hlubokou rezistenci vůči několika cytotoxickým látkám, což ji činí zvláště vhodnou pro studium cest rezistence zprostředkovaných efluxem.

Hlavní mechanismus rezistence u linie NCI-H69AR zahrnuje nadměrnou expresi proteinu P-glykoproteinu (P-gp), který je kódován genem MDR1. P-gp funguje jako ATP-dependentní efluxní pumpa, která snižuje intracelulární akumulaci léčiv, zejména pro antracykliny, vinca alkaloidy a epipodofylotoxiny. Kromě toho NCI-H69AR vykazuje změněnou expresi membránových proteinů, včetně annexinu II, což může souviset se změnami v signalizaci vápníku a vezikulárním obchodování - procesy, které se podílejí na rezistenci vůči lékům a reakci buněk na stres. Tyto fenotypové změny činí z NCI-H69AR cenný model pro identifikaci modulátorů rezistence k léčivům a pro hodnocení účinnosti látek zaměřených na mechanismy efluxu nebo na úplné obejití cest rezistence.

Linie NCI-H69AR byla také použita ve srovnávacích studiích s rodičovskou linií k vymezení změn v expresi genů a proteinů, profilů citlivosti na léčiva a odpovědi na farmakologické inhibitory. Tento srovnávací rámec pomáhá objasnit vývoj lékové rezistence u nádorových onemocnění a přispívá k návrhu kombinovaných terapií zaměřených na re-senzibilizaci rezistentních nádorů. Linie je obvykle kultivována v médiu RPMI-1640 doplněném fetálním hovězím sérem a udržována za standardních atmosférických podmínek. Její robustnost a dobře charakterizovaný fenotyp rezistence jí zajistily místo v preklinickém výzkumu lékové rezistence u rakoviny plic.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení